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我司講解ELISA試劑盒在實(shí)驗(yàn)中的常見問題
閱讀:193 發(fā)布時(shí)間:2020-6-8 1.質(zhì)控血清的運(yùn)用
衛(wèi)生部臨床查驗(yàn)基地制備的乙肝標(biāo)志物質(zhì)控血清,,能夠在-20℃保持半年定值不變,。冰凍狀態(tài)融化運(yùn)用時(shí),,應(yīng)先混勻,,未用完有些可在4℃保留5天。不宜重復(fù)冰融或自行分裝,。展開某項(xiàng)查驗(yàn)的室內(nèi)質(zhì)控工作需要的質(zhì)控血清,,通常按3-6個(gè)月用量預(yù)備。自制的不定值質(zhì)控血清,,在一批質(zhì)控血清將用完之前,,需預(yù)備下一批質(zhì)控血清。質(zhì)控血清請求功能安穩(wěn),,較長期內(nèi)效價(jià)不變,,其理化性質(zhì)應(yīng)與患者樣本附近,這么才干有效地起到監(jiān)測效果,。
2 臨界值質(zhì)控血清
質(zhì)操控血清分定值和不決值兩種,。如只用一份質(zhì)控血清定值,通常定在正常值與異常值交界點(diǎn)上,,定性測守時(shí)處于弱陽性水平,,稱為臨界值,。乙肝標(biāo)志物臨界值的擬定,應(yīng)按臨床請求,,為臨床供給一致的判別弱陽性的規(guī)范,。
臨界值質(zhì)控血清能夠作為試劑盒中的陽性對照品和陰性對照品以外的第三個(gè)對照品,它能夠活絡(luò)地反映出試劑盒的檢出水平,,確保弱陽性反響的標(biāo)本不漏檢,。
3 質(zhì)控血清的制備
每個(gè)實(shí)驗(yàn)室能夠根據(jù)自己的條件,選用臨床基地供給的質(zhì)控血清,,或按以下辦法自己制備本室運(yùn)用的質(zhì)控血清(以乙肝質(zhì)控血清為例),。
1) 搜集新鮮的無溶血、無黃疸,、無細(xì)菌污染的陽性血清,。
2) 56℃加熱10小時(shí)來活。
3) 離心或過濾除掉沉淀,。
4) 用10%的小牛血清或正常人血清(PBS緩沖液)將搜集的血清稀釋至所需的濃度,。如能用正常的人血清稀釋更好,因其成份更接近于檢測標(biāo)本,。
5) 抽濾除菌,。按一次運(yùn)用的量分裝小安瓿,封口,,20℃保留備用,。不行重復(fù)凍融。
被檢物請求檢出的水平常被認(rèn)為是質(zhì)控血清應(yīng)挑選的水平,。如果該實(shí)驗(yàn)還有其它請求,,則應(yīng)加所請求濃度的質(zhì)控物。
6) 標(biāo)定含量,。20-30次測定成果刪去>±2SD數(shù)據(jù)的均值作為靶值,,并與已知定值血清對比測定。