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質(zhì)粒小量提取試劑盒介紹

閱讀:398          發(fā)布時間:2020-1-3

質(zhì)粒小量提取試劑盒注意事項: 

1、溶液Ⅰ在使用前先加入RNaseA(將試劑盒中提供的RNaseA 全部加入),,混勻,,置于2-8℃保存。 

2,、第yi次使用前應按照試劑瓶標簽的說明在漂洗液中加入無水乙 醇配制成工作液(向15ml的漂洗液中加入60ml的無水乙醇 ),。 

3、使用前請先檢查溶液Ⅱ和溶液Ⅲ是否出現(xiàn)混濁,,如有混濁現(xiàn) 象,,可在37℃水浴中加熱幾分鐘,待溶液恢復澄清后再使用,。 

4,、溶液Ⅱ、溶液Ⅲ和漂洗液使用后應立即蓋緊蓋子,,如非指明,,所 有離心步驟均為使用臺式離心機 室溫下進行離心。 

5,、如果是提取革蘭氏陽性菌質(zhì)粒,,必須在裂解細胞前破細胞 壁,方法如下:收集適量菌體,,加入250ul溶液Ⅰ,,充分懸浮 菌體,加入溶菌酶至終濃度為10-20mg/ml,,37℃處理30min 左右,。加入溶菌酶的濃度和處理時間可根據(jù)不同的菌株和具體 試驗條件進行調(diào)整。 

6,、洗脫緩沖液的體積好不少于50ul,,體積過小會影響回收效 率;洗脫液的pH值對洗脫效率也有影響,若需要用水做洗脫液 應保證其pH值在8.0左右(可用NaOH將水的pH值調(diào)至此范 圍),,pH值低于7.0會降低洗脫效率,。

質(zhì)粒小量提取試劑盒介紹:

本試劑盒采用堿裂解法裂解細胞,通過吸附柱在高鹽狀態(tài)下特異性地結合溶液中的DNA的特性提取質(zhì)粒DNA,。吸附柱中采用的硅基質(zhì)材料能高效,、專一地吸附DNA,可大限度去除雜質(zhì)蛋白質(zhì)及細胞中其他有機化合物,。從1-5ml大腸桿菌LB培養(yǎng)液中,可快速提取5-15μg純凈地高拷貝質(zhì)粒DNA,,提取率達85-90%,。使用本試劑盒提取的質(zhì)粒DNA可適用于各種常規(guī)的分子生物學試驗,包括酶切,、PCR,、測序、連接和轉化等試驗,。本試劑盒無需使用酚,、氯fang等有毒試劑,操作安全,。

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