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究竟是什么造成細胞培養(yǎng)基產(chǎn)生沉淀呢
閱讀:726 發(fā)布時間:2019-12-27細胞培養(yǎng)基中的渾濁 產(chǎn)生沉淀的可能原因
一,、溫度變化
在細胞培養(yǎng)中,,溫度是引起沉淀的主要因素之一。當遭遇溫度的變化時,,高分子量血漿蛋白會從溶液中析出,;熱失活和凍融循環(huán)能促進蛋白降解和沉淀;因為液體或重組成培養(yǎng)基在使用之間保持冷藏儲存,鹽可能沉淀,,尤其是10x或其他濃縮的儲存液,。
二、失水誘導的濃度改變
如果培養(yǎng)基可能蒸發(fā),,培養(yǎng)基組分(包括鹽) 的濃度將會增加,,特別是培養(yǎng)基表面可能容易形成晶體沉淀。
三,、鈣鹽
制備無血清培養(yǎng)基時,,組分添加的順序可能導致不可溶分子的形成。鈣鹽尤其容易沉淀,,比如CaCl2和MgSO4在溶液中反應產(chǎn)生CaSO4晶體,。高壓滅菌和pH值不穩(wěn)定會加劇這一問題。
四,、金屬補充物
銅,、鐵和鋅等金屬離子是細胞生長所必需的,是無血清培養(yǎng)基的重要補充物,。培養(yǎng)系統(tǒng)中其他血清組分的缺失可能導致這些金屬沉淀,,為細胞形成有毒的環(huán)境。在較高pH環(huán)境下(一般>8時),,碳酸鹽和氫氧根離子與銅離子,、磷酸鹽和氫氧根離子與鐵離子、碳酸鹽,、磷酸鹽和氫氧根離子與鋅離子,、氫氧根離子與鎂離子易形成不溶性沉淀物;在氧化條件下,,銅和鋅更易于沉淀,。