日韩av大片在线观看欧美成人不卡|午夜先锋看片|中国女人18毛片水多|免费xx高潮喷水|国产大片美女av|丰满老熟妇好大bbbbbbbbbbb|人妻上司四区|japanese人妻少妇乱中文|少妇做爰喷水高潮受不了|美女人妻被颜射的视频,亚洲国产精品久久艾草一,俄罗斯6一一11萝裸体自慰,午夜三级理论在线观看无码

                               大鼠肺動脈成纖維細(xì)胞操作說明

 

   別人 給你的糖，甜過一陣就澀了,，委屈時靠的肩膀,，等眼淚流完后就離開了，面前朝你伸來的手,，繞過這個峭壁就沒空牽你了,。當(dāng)有一天，你發(fā)現(xiàn)自己炒的菜香,，自己種的果甜,，自己抹掉眼淚才是成長，自己翻過山巒才算到過天空,，你就會知道,，幸福需要經(jīng)營，你想要的人生,，只能自己給自己,。早上好！接下來介紹大鼠肺動脈成纖維細(xì)胞操作說明,。

 

 

細(xì)胞處理：

 

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍,，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。

 

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。

 

對于懸浮細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：

 

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM,，常溫條件下離心5分鐘,，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。

 

培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

 

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO,，貨號21875-091)，90%,；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%。

 

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%,；二氧化碳，5%,。 溫度：37℃,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

 

3）凍存液：90%血清,，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存,。