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ELISA試劑盒的這兩種分類你了解么
閱讀:255 發(fā)布時間:2019-7-15ELISA試劑盒的這兩種分類你了解么
春雨綿綿,小水珠飄在桃花那胭脂般嬌嫩的花瓣上,,不停地滾動著,聚集著,,花瓣上便出現(xiàn)了成千上萬顆閃爍著光彩的“珍珠”,。小編為你介紹ELISA試劑盒, 血清是常用的標(biāo)本,,血漿一般可視為與血清同等的標(biāo)本,,標(biāo)本引起的假陽性和假陰性結(jié)果主要是干擾性物質(zhì)所致,ELISA試劑盒分為內(nèi)源性物質(zhì)和外源性物質(zhì)兩種:
(1)標(biāo)本溶血
由于各種人為原因引起的標(biāo)本溶血,,均可因紅細(xì)胞破壞溶解時釋放出大量具有過氧化物酶活性的血紅蛋白,,在以辣根過氧化物酶為標(biāo)記的ELISA測定中,會導(dǎo)致非特異性顯色,,干擾測定結(jié)果,。為克服上述干擾作用,標(biāo)本采集時必須注意避免溶血,。
?。?)標(biāo)本受細(xì)菌污染
因菌體中可能含有內(nèi)源性辣根過氧化物酶,因此,,被細(xì)菌污染的標(biāo)本同溶血標(biāo)本一樣,,亦可產(chǎn)生非特異性顯色而干擾測定結(jié)果。
?。?)標(biāo)本保存不當(dāng)
在冰箱中保存過久的標(biāo)本,,血清中IgG可聚合成多聚體,、AFP可形成二聚體,在間接法ELISA測定中會導(dǎo)致本底過深,、甚至造成假陽性,;標(biāo)本放置時間過長(如一天以上),有時抗原或抗體免疫活性減弱,,亦可出現(xiàn)假陰性,。為克服上述干擾,ELISA測定的血清標(biāo)本宜為新鮮采集,;如不能立即測定,,5天內(nèi)測定的血清標(biāo)本可存放于4℃,1周后測定的血清標(biāo)本應(yīng)低溫凍存,;凍存后融解的標(biāo)本,,蛋白質(zhì)局部濃縮,分布不均,,應(yīng)充分混合后再測定,,但混勻時應(yīng)輕柔,不可強(qiáng)烈振蕩,。
?。?)標(biāo)本凝集不全
在沒有促凝劑和抗凝劑存在的情況下,正常血液采集后1/2~2h開始凝固,,18~24h*凝固,。臨床檢驗(yàn)工作中,有時為了爭取時間快速檢測,,常在血液還未開始凝固時即強(qiáng)行離心分離血清,此時的血清中仍殘留部分纖維蛋白原,,在ELISA測定過程中可以形成肉眼可見的纖維蛋白塊,,易造成假陽性結(jié)果;這類情況于次日復(fù)查時因血凝已*,,血清中不再有纖維蛋白原存在,,故復(fù)查結(jié)果變?yōu)殛幮浴楸苊馍鲜龈蓴_作用,,解決的辦法是血液標(biāo)本采集后必須使其充分凝固后再分離血清,,或標(biāo)本采集時用帶分離膠的采血管或于采血管中加入適當(dāng)?shù)拇倌齽?/span>
(5)人ELISA試劑盒標(biāo)本管中添加物質(zhì)的影響
抗凝劑(如肝素,,EDTA),、酶抑制劑(如NaN3可抑制ELISA系統(tǒng)中辣根過氧化物酶活性)及快速分離血清的分離膠等均對ELISA測定有一定干擾作用。