技術(shù)文章
ELISA試劑盒的這兩種分類你了解么
閱讀:283 發(fā)布時(shí)間:2019-7-15ELISA試劑盒的這兩種分類你了解么
春雨綿綿,小水珠飄在桃花那胭脂般嬌嫩的花瓣上,,不停地滾動(dòng)著,,聚集著,花瓣上便出現(xiàn)了成千上萬(wàn)顆閃爍著光彩的“珍珠”,。小編為你介紹ELISA試劑盒,, 血清是常用的標(biāo)本,血漿一般可視為與血清同等的標(biāo)本,,標(biāo)本引起的假陽(yáng)性和假陰性結(jié)果主要是干擾性物質(zhì)所致,,ELISA試劑盒分為內(nèi)源性物質(zhì)和外源性物質(zhì)兩種:
(1)標(biāo)本溶血
由于各種人為原因引起的標(biāo)本溶血,均可因紅細(xì)胞破壞溶解時(shí)釋放出大量具有過(guò)氧化物酶活性的血紅蛋白,在以辣根過(guò)氧化物酶為標(biāo)記的ELISA測(cè)定中,,會(huì)導(dǎo)致非特異性顯色,,干擾測(cè)定結(jié)果。為克服上述干擾作用,,標(biāo)本采集時(shí)必須注意避免溶血,。
(2)標(biāo)本受細(xì)菌污染
因菌體中可能含有內(nèi)源性辣根過(guò)氧化物酶,,因此,,被細(xì)菌污染的標(biāo)本同溶血標(biāo)本一樣,亦可產(chǎn)生非特異性顯色而干擾測(cè)定結(jié)果,。
?。?)標(biāo)本保存不當(dāng)
在冰箱中保存過(guò)久的標(biāo)本,血清中IgG可聚合成多聚體,、AFP可形成二聚體,,在間接法ELISA測(cè)定中會(huì)導(dǎo)致本底過(guò)深、甚至造成假陽(yáng)性,;標(biāo)本放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(如一天以上),,有時(shí)抗原或抗體免疫活性減弱,亦可出現(xiàn)假陰性,。為克服上述干擾,,ELISA測(cè)定的血清標(biāo)本宜為新鮮采集;如不能立即測(cè)定,,5天內(nèi)測(cè)定的血清標(biāo)本可存放于4℃,,1周后測(cè)定的血清標(biāo)本應(yīng)低溫凍存;凍存后融解的標(biāo)本,,蛋白質(zhì)局部濃縮,,分布不均,應(yīng)充分混合后再測(cè)定,,但混勻時(shí)應(yīng)輕柔,,不可強(qiáng)烈振蕩。
?。?)標(biāo)本凝集不全
在沒(méi)有促凝劑和抗凝劑存在的情況下,,正常血液采集后1/2~2h開(kāi)始凝固,18~24h*凝固,。臨床檢驗(yàn)工作中,,有時(shí)為了爭(zhēng)取時(shí)間快速檢測(cè),常在血液還未開(kāi)始凝固時(shí)即強(qiáng)行離心分離血清,,此時(shí)的血清中仍殘留部分纖維蛋白原,,在ELISA測(cè)定過(guò)程中可以形成肉眼可見(jiàn)的纖維蛋白塊,,易造成假陽(yáng)性結(jié)果;這類情況于次日復(fù)查時(shí)因血凝已*,,血清中不再有纖維蛋白原存在,,故復(fù)查結(jié)果變?yōu)殛幮浴楸苊馍鲜龈蓴_作用,,解決的辦法是血液標(biāo)本采集后必須使其充分凝固后再分離血清,,或標(biāo)本采集時(shí)用帶分離膠的采血管或于采血管中加入適當(dāng)?shù)拇倌齽?/span>
(5)人ELISA試劑盒標(biāo)本管中添加物質(zhì)的影響
抗凝劑(如肝素,,EDTA)、酶抑制劑(如NaN3可抑制ELISA系統(tǒng)中辣根過(guò)氧化物酶活性)及快速分離血清的分離膠等均對(duì)ELISA測(cè)定有一定干擾作用,。