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植物ELISA檢測(cè)試劑盒的操作說(shuō)明
閱讀：334 發(fā)布時(shí)間：2019-5-22植物ELISA檢測(cè)試劑盒的操作說(shuō)明
首先植物ELISA檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)*步是加樣
在植物ELISA檢測(cè)試劑盒中除了包被外,，一般需進(jìn)行45加樣,。在定性測(cè)定中有時(shí)不強(qiáng)調(diào)加樣量的準(zhǔn)確性，例如規(guī)定為加樣一滴,。此時(shí)應(yīng)該使用相同口徑的滴管,，保持準(zhǔn)確的加樣姿勢(shì)，使每滴液體的體積基本相同,。在定量測(cè)定中則加樣量應(yīng)力求準(zhǔn)確,。標(biāo)本和結(jié)合物的稀釋液應(yīng)按規(guī)定配制。加樣時(shí)應(yīng)將液體加在孔底,，避免加在孔壁上部,，并注意不可出現(xiàn)氣泡。
植物ELISA檢測(cè)試劑盒第二步保溫
在植物ELISA檢測(cè)試劑盒中一般有二次抗原抗體反應(yīng),，即加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,，此時(shí)反應(yīng)的溫度和時(shí)間應(yīng)按規(guī)定的要求，保溫容器是水浴箱,，可使溫度迅速平衡,。各ELISA板不應(yīng)疊在一起。為避免蒸發(fā),，板上應(yīng)加蓋,，或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕紗布的濕盒中。濕盒應(yīng)該是金屬的,，傳熱容易,。如用保溫箱，空濕盒應(yīng)預(yù)先放在其中,，以平衡溫度,，這在室溫較低時(shí)更為重要。加入底物后,，反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求,。如室溫高于20℃,，ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上，以便不時(shí)觀察,，待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí),，即可終止酶反應(yīng)
其次植物ELISA檢測(cè)試劑盒的洗滌也是非常關(guān)鍵的
洗滌在植物ELISA檢測(cè)試劑盒過(guò)程中不是反應(yīng)聚，但卻是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵,。洗滌的目的是洗去反應(yīng)液中沒(méi)有與固相抗原或抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過(guò)程中非特異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì),。聚苯乙烯待塑料對(duì)蛋白質(zhì)的吸附作用是普遍性的。因此在植物ELISA檢測(cè)試劑盒測(cè)定的反應(yīng)過(guò)程中應(yīng)盡量避免非特異性吸附,，而在洗滌時(shí)又應(yīng)把這種非特異性吸附的干擾物質(zhì)洗滌下來(lái),。在標(biāo)本和結(jié)合物的稀釋液和洗滌液中加入聚山梨酯一類(lèi)物質(zhì)即右達(dá)到此目的。聚山梨酯是聚氧乙烯去水山梨醇脂肪酸酯,，為非離子型的表面張力物質(zhì),，常作為助溶劑。根據(jù)脂肪酸的種類(lèi)而對(duì)聚山梨酯編號(hào),，結(jié)合月桂酸的為聚山梨酯20,，在ELISA中zui為常用。它的洗滌效果好,，并具有減少非特異性吸附和增強(qiáng)抗原抗體結(jié)合的作用,。
洗滌如不*，特別在zui后一次,，如有酶結(jié)合物的非特異性吸附,，將使空白值升高。另外,，在間接法中如血清標(biāo)本內(nèi)的非特異性IgG吸附在固相上而未被洗凈,，也將與酶標(biāo)抗體作用而產(chǎn)生干擾。
zui后一步比色
如陰性對(duì)照顏色極淺,，在定性測(cè)定中一般可采用目視比色,。如用比色計(jì)測(cè)定結(jié)果，準(zhǔn)確性決定于ELISA板底的平整與透明度和比色計(jì)的質(zhì)量,。