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人ELISA試劑盒雙抗夾心法的檢測原理

雙抗體夾心法是檢測抗原*常用的方法,，操作步驟如下：

1） 將特異性抗體與固相載體聯(lián)結(jié),，形成固相抗體。洗滌除去未結(jié)合的抗體及雜質(zhì),。

2） 加受檢標(biāo)本,，保溫反應(yīng)。標(biāo)本中的抗原與固相抗體結(jié)合,，形成固相抗原抗體復(fù)合物,。 洗滌除去其他未結(jié)合物質(zhì)。

3） 加酶標(biāo)抗體,，保溫反應(yīng),。固相免疫復(fù)合物上的抗原與酶標(biāo)抗體結(jié)合。*洗滌未結(jié)合 的酶標(biāo)抗體,。此時固相載體上帶有的酶量與標(biāo)本中受檢抗原的量相關(guān),。

4） 加底物顯色。固相上的酶催化底物成為有色產(chǎn)物,。通過比色,，測知標(biāo)本中抗原的量。 在臨床檢驗中,，此法適用于檢驗各種蛋白質(zhì)等大分子抗原,，例如hbsag、hbeag,、afp,、hcg等。只要獲得針對受檢抗原的異性抗體,，就可用于包被固相載體和制備酶結(jié)合物而建立此法,。如抗體的來源為抗血清，包被和酶標(biāo)用的抗體分別取自不同種屬的動物,。如應(yīng)用單克隆抗體,，一般選擇兩個針對抗原上不同決定簇的單抗，分別用于包被固相載體和制備酶結(jié)合物,。這種雙位點夾心法具