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技術(shù)文章

人凝膠原蛋白(gelson)ELISA試劑盒樣本儲存及樣本處理及要求

閱讀:502          發(fā)布時(shí)間:2018-12-6

人凝膠原蛋白(gelson)ELISA試劑盒  【樣本儲存】:收集標(biāo)本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定,。對收集后當(dāng)天進(jìn)行檢測的標(biāo)本,儲存在4℃?zhèn)溆?,如有特殊原因需要周期收集?biāo)本,,將標(biāo)本及時(shí)分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。避免反復(fù)凍融,。標(biāo)本2-8℃可保存48小時(shí),,-20℃可保存1個(gè)月。-70℃可保存6個(gè)月,。部分激素類標(biāo)本需添加抑肽酶,。

人凝膠原蛋白(gelson)ELISA試劑盒   樣本處理及要求:

1. 血清:室溫血液自然凝固10-20 分鐘,離心20 分鐘左右(2000-3000 轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上

清,,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,,應(yīng)再次離心。

2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,,混合10-20 分鐘后,,離心

20 分鐘左右(2000-3000 轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,,保存過程中如有沉淀形成,,應(yīng)該再次

離心。

3. 尿液:用無菌管收集,,離心20 分鐘左右(2000-3000 轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清,保存過程

中如有沉淀形成,,應(yīng)再次離心。胸腹水,、腦脊液參照實(shí)行,。

4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時(shí),用無菌管收集,。離心20 分鐘左右(2000-3000 轉(zhuǎn)/

分),。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,,細(xì)胞

濃度達(dá)到100 萬/ml 左右。通過反復(fù)凍融,,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,。離心20 分

鐘左右(2000-3000 轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,。保存過程中如有沉淀形成,,應(yīng)再次離心。

5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,,稱取重量,。加入一定量的PBS,PH7.4,。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)?/p>

用,。標(biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),,用手工或勻漿器

將標(biāo)本勻漿充分,。離心20 分鐘左右(2000-3000 轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,。分裝后一份待

檢測,,其余冷凍備用,。

6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn),。若不能馬上

進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.

7. 不能檢測含NaN3 的樣品,,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

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