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溫育常選用的溫度有43℃,、37℃、室溫文4℃等,。37℃是實驗室中常用的保溫溫度,，也是大多數(shù)抗原抗體結(jié)合的合適溫度。在樹立ELISA方法作反響動力學(xué)研討時,，實驗表明,，兩次抗原抗體反響一般在37℃經(jīng)1～2小時，產(chǎn)物的生成可達高峰,。為加快反響,，可進步反響的溫度，有些實驗在43℃進行,，但不宜選用更高的溫度,。抗原抗體反響4℃更為*,，在放射免疫測定中多使反響在冰箱中過夜,，以構(gòu)成zui多的沉積。但因所需時刻太長,，在ELISA試劑盒中一般不予選用,。

保溫的方式除有的ELISA儀器附有特制的電熱塊外，一般均選用水浴,，可將ELISA試劑盒板置于水浴箱中,，ELISA板底應(yīng)貼著水面，使溫度敏捷平衡,。為防止蒸騰,，板上應(yīng)加蓋，也可用塑料貼封紙或保鮮膜覆蓋板孔,，此刻可讓反響板漂浮在水面上,。若用保溫箱,，ELISA試劑盒應(yīng)放在濕盒內(nèi)，濕盒要選用傳熱性杰出的材料如金屬等,，在盒底墊濕的紗布,，zui后將ELISA板放在濕紗布上。濕盒應(yīng)先放在保溫箱中預(yù)溫至規(guī)則的溫度,，特別是在氣溫較低的時候更應(yīng)如此,。無論是水浴仍是濕盒溫育，反響板均不宜疊放,，以確保各板的溫度都能敏捷平衡,。室溫溫育的反響，操作時的室溫應(yīng)嚴(yán)厲約束在規(guī)則的范圍內(nèi),，規(guī)范室溫溫度是指20～25℃,，但具體操作時可根據(jù)說明書的要求操控溫育。大鼠ELISA試劑盒室溫溫育時,，ELISA試劑盒只要平置于操作臺上即可,。應(yīng)留意溫育的溫度和時刻應(yīng)按規(guī)則力求。為確保這一點,，一個人操作時,，一次不宜多于兩塊板同時測定。