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技術(shù)文章

人結(jié)締組織活化肽ⅢELISA試劑盒操作方法

閱讀:387          發(fā)布時(shí)間:2018-9-26

實(shí)驗(yàn)室試劑耗材采購(gòu)網(wǎng)長(zhǎng)期經(jīng)營(yíng)人結(jié)締組織活化肽Ⅲ(CTAPⅢ)ELISA試劑盒, CTAPⅢ ELISA kit
及抗體,、細(xì)胞因子,、生化試劑、耗材等生物試劑產(chǎn)品,。誠(chéng)信經(jīng)營(yíng),價(jià)格實(shí)惠,,服務(wù)周到,,質(zhì)量有保證。實(shí)驗(yàn)室試劑耗材采購(gòu)網(wǎng)長(zhǎng)期經(jīng)營(yíng)人結(jié)締組織活化肽Ⅲ(CTAPⅢ)ELISA試劑盒, CTAPⅢ ELISA kit
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1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。 
8 ng/L 5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 
4 ng/L 4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 
2 ng/L 3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 
1 ng/L 2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 
0.5 ng/L 1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 
2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,,其余各步操作相同),、標(biāo)準(zhǔn)孔、 
待測(cè)樣品孔,。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后 
再加待測(cè)樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍),。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,,盡量不觸 
及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,。 
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘,。 
4.配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用 
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,,甩干,,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,,如此重復(fù) 
5次,,拍干。 
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,,空白孔除外,。 
7.溫育:操作同3。 
8.洗滌:操作同5,。 
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,,再加入顯色劑B50μl,,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘. 
10.終止:每孔加終止液50μl,,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色),。 
11.測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值),。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后 
15分鐘以內(nèi)進(jìn)行,。 
 

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