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大鼠ELISA試劑盒深入解析免疫組化實(shí)驗(yàn)的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)
1,、免疫組化實(shí)驗(yàn)所用的組織和細(xì)胞標(biāo)本有哪些,？
   實(shí)驗(yàn)所用主要為組織標(biāo)本和細(xì)胞標(biāo)本兩大類,，前者包括石蠟切片（病理大片和組織芯片）和冰凍切片,，后者包括組織印片、細(xì)胞爬片和細(xì)胞涂片,。其中石蠟切片是制作組織標(biāo)本*常用,、*基本的方法，對于組織形態(tài)保存好,，且能作連續(xù)切片,，有利于各種染色對照觀察；還能長期存檔,，供回顧性研究,；石蠟切片制作過程對組織內(nèi)抗原暴露有一定的影響，但可進(jìn)行抗原修復(fù),，是免疫組化中的組織標(biāo)本制作方法,。
2、背景：
①考慮一抗?jié)舛雀撸?br />②然后調(diào)整DAB孵育時(shí)間,；
③也要考慮血清封閉時(shí)間是否過短,；
④適當(dāng)增加抗體孵育后的浸洗次數(shù)和延長浸洗時(shí)間等。
3,、免疫組化常用的染色方法有哪些,？
根據(jù)標(biāo)記物的不同分為免疫熒光法，免疫酶標(biāo)法,，親和組織化學(xué)法,，后者是以一種物質(zhì)對某種組織成分具有高度親合力為基礎(chǔ)的檢測方法。這種方法敏感性更高,，有利于微量抗原(抗體)在細(xì)胞或亞細(xì)胞水平的定位,，其中生物素——抗生物素染色法*常用。
4,、石蠟切片為什么要做抗原修復(fù),？有哪些方法？
   石蠟切片標(biāo)本均用甲醛固定,，使得細(xì)胞內(nèi)抗原形成醛鍵,、羧甲鍵而被封閉了部分抗原決定簇，同時(shí)蛋白之間發(fā)生交聯(lián)而使抗原決定簇隱蔽,。所以要求在進(jìn)行IHC染色時(shí),，需要先進(jìn)行抗原修復(fù)或暴露，即將固定時(shí)分子之間所形成的交聯(lián)破壞,，而恢復(fù)抗原的原有空間形態(tài),。常用的抗原修復(fù)方法有微波修復(fù)法,，高壓加熱法，酶消化法,，水煮加熱法等,，常用的修復(fù)液是pH6.0的0.01 mol/L的檸檬酸鹽緩沖液。
5,、石蠟切片在染色過程中出現(xiàn)脫片現(xiàn)象：
①烤片時(shí)間不夠,，或溫度不夠，可以延長烤片時(shí)間和提高烤片溫度,；  
②用含有多聚賴氨酸的玻片,，可以購買到或這自己做；
③有些組織本身就容易掉片,，如骨組織等,，操作時(shí)沖PBS不要直接沖到組織上，沖到組織上方,，讓它流下沖洗組織,； 
④用高溫修復(fù)時(shí)，溫度驟冷也可能引起,。
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