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人ELISA試劑盒樣本值低于空白值的原因分析
閱讀：560 發(fā)布時間：2018-8-13人ELISA試劑盒樣本值低于空白值的原因分析
在ELISA實驗中,，當(dāng)樣本值較低接近試劑盒的靈敏度就容易發(fā)生樣本值低于空白值的現(xiàn)象,，特別是在血清和血漿樣本的檢測,。我公司ELISA試劑盒技術(shù)專家對此現(xiàn)象的原因分析有兩個方面,，一是實驗誤差、二是基質(zhì)效應(yīng) ,。
*,、實驗誤差
誤差分為三類，系統(tǒng)誤差,、隨機誤差和過失誤差,。這三類誤差中，系統(tǒng)誤差對樣本值和空白值之間的差異無影響,。ELISA樣本值低于空白值在誤差方面主要來源于隨機誤差和過失誤差,。
*、基質(zhì)效應(yīng)
分析中,，基質(zhì)指的是樣本中被分析物之外的組分,，基質(zhì)常常對分析物的分析過程有顯著的干擾,，并影響分析結(jié)果的準(zhǔn)確性，這些影響和干擾被稱為基質(zhì)效應(yīng),。ELISA試劑盒在開發(fā)過程中,，標(biāo)準(zhǔn)品不能采用人或動物血清、血漿作為標(biāo)準(zhǔn)曲線的稀釋液,，只能采用其模擬物,。模擬物與被測樣本在蛋白豐度、復(fù)雜性,、pH等因素都會存在差異,。當(dāng)樣本的基質(zhì)與其模擬物相比，降低抗原抗體的結(jié)合,，便產(chǎn)生了樣本值低于空白值的現(xiàn)象,。造成樣本值無法計算出數(shù)值，或者數(shù)值為負(fù),。
目前zui常用的去除基質(zhì)效應(yīng)的方法是,，通過已知分析物濃度的標(biāo)準(zhǔn)樣品，同時盡可能保持樣本中的基質(zhì)不變,，建立一個校正曲線,。
當(dāng)單個樣本或少量樣本值低于空白值時，可能是誤差原因,，這時應(yīng)增加重復(fù),，提高操作技能。當(dāng)大量樣本都低于空白值時,，應(yīng)考慮基質(zhì)效應(yīng)的影響,，建立校正曲線予以修正。
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