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人ELISA試劑盒實驗操作時的注意事項和要點

閱讀:330          發(fā)布時間:2018-5-2

人ELISA試劑盒實驗操作時的注意事項和要點
(1)劃分操作區(qū):目前,,普通PCR尚不能做到單人單管,實現(xiàn)*閉管操作,,但無論是否能夠達到單人單管,,均要求實驗操作在三個不同的區(qū)域內(nèi)進行,,PCR的前處理和后處理要在不同的隔離區(qū)內(nèi)進行:
① 標本處理區(qū),包括擴增摸板的制備,;
② PCR擴增區(qū),包括反應液的配制和PCR擴增,;
③ 產(chǎn)物分析區(qū),,凝膠電泳分析,產(chǎn)物拍照及重組克隆的制備,。
各工作區(qū)要有一定的隔離,操作器材,,要有一定的方向性,。如:標本制備→PCR擴增→產(chǎn)物分析→產(chǎn)物處理。
切記:產(chǎn)物分析區(qū)的產(chǎn)物及器材不要拿到其他兩個工作區(qū),。
(2)分裝試劑:PCR擴增所需要的試劑均應在裝有紫外燈的超凈工作臺或負壓工作臺配制和分裝。所有的加樣器和吸頭需固定放于其中,,不能用來吸取擴增后的DNA和其他來源的DNA:
① PCR用水應為高壓的雙蒸水,;
② 引物和dNTP用高壓的雙蒸水在無PCR擴增產(chǎn)物區(qū)配制;
③ 引物和dNTP應分裝儲存,,分裝時應標明時間,以備發(fā)生污染時查找原因,。
(3) 實驗操作注意事項 盡管擴增序列的殘留污染大部分是假陽性反應的原因,,樣品間的交叉污染也是原因之一。
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