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小鼠ELISA試劑盒檢測(cè)要點(diǎn)
閱讀:60 發(fā)布時(shí)間:2018-4-16小鼠ELISA試劑盒檢測(cè)要點(diǎn)
·要點(diǎn)一:
血清標(biāo)本可按常規(guī)方法采集,,應(yīng)留意避免溶血,紅細(xì)胞溶解時(shí)會(huì)開(kāi)釋出具有過(guò)氧化物酶活性的物質(zhì),以HRP為標(biāo)記的ELISA 測(cè)定中,,溶血標(biāo)本可能會(huì)增加非特異性顯色,。ELISA的操縱因固相載體的形成不同而有所差異,海內(nèi)醫(yī)學(xué)檢修一般均用板式點(diǎn),。
·要點(diǎn)二:標(biāo)本的采取和保留
可用作ELISA測(cè)定的標(biāo)本十分廣泛,,體液、分泌物和排泄物等均可作標(biāo)本以測(cè)定其中某種抗體或抗原成份,。反復(fù)凍融會(huì)使抗體效價(jià)跌落,,所以測(cè)抗體的血清標(biāo)本如需保留作多次檢測(cè),宜少量分裝冰存,。一般說(shuō)來(lái),,在5天內(nèi)測(cè)定的血清標(biāo)本可放置于4℃,超過(guò)一周測(cè)定的需低溫冰存,。如在冰箱中保留過(guò)久,,其中的可發(fā)生聚合,在間接法ELISA 中可使本底加深,。保留血清自采集時(shí)就應(yīng)留意無(wú)菌操縱,,也可加入適當(dāng)防腐劑。除特殊情況外,,在醫(yī)學(xué)檢修中均以血清作為檢測(cè)標(biāo)本,。本文將敘述板式ELISA各個(gè)操縱步驟的留意要點(diǎn),珠式,、管式及磁性球ELISA,,試劑盒均與特殊儀器配合應(yīng)用,兩者均有具體的使用說(shuō)明,,嚴(yán)格遵照劃定操縱,,必能得出正確的結(jié)果。
·要點(diǎn)三:
的試劑,,良好的儀器和準(zhǔn)確的操縱是保證ELISA試劑盒檢測(cè)結(jié)果正確可靠的必要前提,。血清標(biāo)本宜在新鮮時(shí)檢測(cè)。血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑外,,其他成份均同即是血清,。如有細(xì)菌污染,菌體中可能含有內(nèi)源性HRP ,,也會(huì)產(chǎn)生假陽(yáng)性反應(yīng),。有些標(biāo)本可直接進(jìn)行測(cè)定,有些則需經(jīng)預(yù)處理,。制備血漿標(biāo)本需借助于抗凝劑,,而血清標(biāo)本只要待血清天然凝固,、收縮后即可取得。大部門(mén)ELISA檢測(cè)均以血清為標(biāo)本,。在ELISA中血漿和血清可平等應(yīng)用,。凍結(jié)血清融解后,蛋白質(zhì)局部濃縮,,分布不均,,應(yīng)充分混勻宜輕緩,避免氣泡,,可上下倒置混和,,不要在混勻器上強(qiáng)烈振蕩?;鞚峄蛴谐恋淼难鍢?biāo)本應(yīng)先離心或過(guò)濾,,澄清后再檢測(cè)。
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