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大鼠ELISA試劑盒實驗技術(shù)問答匯總
閱讀:534 發(fā)布時間:2018-2-28大鼠ELISA試劑盒實驗技術(shù)問答匯總
1. 血清保存: 建議血清應保存在-5℃至-2O℃,。然而,,若存放于4℃時,,請勿超過一個月。若您一次無法用完一瓶,,建議您無菌分裝血清至恰當?shù)臏缇萜鲀?nèi),,再放回冷凍。
2. 解凍血清的方法: 建議您將血清從冷凍箱取出后,,先置于2~8℃冰箱使之融解,,然后在室溫下使之全融。但必須注意的是,,融解過程中必須規(guī)則地搖晃均勻,。
3. 血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn),該如何處理?
血清中沉淀物的出現(xiàn)有許多種原因,但zui普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成,,而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解凍后,,也會存在于血清中,亦是造成沉淀物的主要原因之一,。但這些絮狀沉淀物,,并不影響血清本身的質(zhì)量。
若您欲去除這些絮狀沉淀物,,可以將血清分裝至無菌離心管內(nèi),,以400g稍微離心,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾。我們不建議您以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物,,因為它可能會阻塞您的過濾膜,。
4. 為什么要熱滅活血清?
加熱可以滅活補體系統(tǒng)。激活的補體參與溶解細胞事件,,刺激平滑肌收縮,,細胞和血小板釋放組胺,激活淋巴細胞和巨噬細胞,。在免疫學研究,,培養(yǎng)ES細胞,昆蟲細胞和平滑肌細胞時,,推薦使用熱滅活血清,。
5. 有必要做熱滅活嗎?
實驗顯示,經(jīng)過正確處理的熱滅活血清,,對大多數(shù)的細胞而言是不需要的,。經(jīng)此處理過的血清對細胞的生長只有微小的促進,或*沒有任何作用,,甚至通常因為高溫處理影響了血清的質(zhì)量,,而造成細胞生長速率的降低。而經(jīng)過熱處理的血清,,沉淀物的形成會顯著的增多,,這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察,像是“小黑點”,,常常會讓研究者誤以為是血清遭受污染,,而把血清放在37℃環(huán)境中,又會使此沉淀物更增多,,使研究者誤認為是微生物的分裂擴增,。
因此我們建議您,若非必須,,您可以不需要做熱處理這一步,。如此一來,,不但節(jié)省您寶貴的時間,更確保血清的質(zhì)量!
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