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大鼠ELISA試劑盒操作的通用規(guī)則
閱讀:809 發(fā)布時間:2017-12-20大鼠ELISA試劑盒操作的通用規(guī)則:
1,、要確保微量加樣器的準確性,可以使用蒸餾水和電子天平進行確定(由于蒸餾水不含雜質(zhì),,溫度環(huán)境為20%左右時,,lmL的水可以看作是lg、200 L的水可以看作是0.2g)每一把微量加樣器都應(yīng)該將其zui高量程和zui低量程進行確定,。
2,、 在使用微量加樣器時,吸取不同瓶子中液體后要更換槍頭,,即使吸取標準品溶液,。
3、吸取液體時速度不易太快,,以免產(chǎn)生氣泡,,吸取的量不夠準確。
4,、 將液體加到酶標孔中時,,避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孑L壁接觸,液滴會自然流下去,。吸入液體時的的方法是吸兩檔打一檔,,防止由于槍頭的毛細作用使得部分液體不能流出而造成的誤差。
5,、吸取液體時要選用量程和需要量接近的微量加樣器吸,,減少誤差。
6,、 液體全部加入酶標孔后,,將酶標板放在桌子上平行輕輕搖晃30s,使液體充分混合均勻,,也使其得到充分的反應(yīng),。
7、孵育時要使蓋板膜封好酶標板,,防止水分蒸發(fā),,以防曲線不成線性。
8,、 實驗前30min將試劑盒中的所有試劑從冰箱取出,,使試劑盒中的所有試劑與提取好的樣品溶液的溫度相同,酶標板只要取出所需量,。
9,、由于底物顯色劑對光及其敏感,因此要避光保存,。
10,、手工洗板時每次加入洗滌液后。應(yīng)靜置15~30s,,不要將一個酶標孑L中的洗滌液濺入11,、檢測吸光度前應(yīng)將酶標儀打開,將其預(yù)熱30min以上,。
12,、 底物為TMB,避免與皮膚相接觸,。終止液為2tool的濃硫酸具有腐蝕性,,應(yīng)盡量避免接觸皮膚
13、 孵育的時間應(yīng)該嚴格按照試劑盒說明書上的時間為準,。
14,、 要盡量做雙孔實驗,這樣才既能保證數(shù)據(jù)的準確性,,又能反映出試劑盒的精密度,。
15,、 對樣本的結(jié)果有疑問時需要使用其他檢測方法進行驗證。
16,、沒有去離子水或雙蒸水時,,可以使用娃哈哈純凈水配制溶液,切勿使用自來水,。
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