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大鼠ELISA試劑盒經(jīng)驗(yàn)技術(shù)也是很重要的，常見(jiàn)的技術(shù)指南
閱讀：456 發(fā)布時(shí)間：2017-11-29大鼠ELISA試劑盒經(jīng)驗(yàn)技術(shù)也是很重要的,，常見(jiàn)的技術(shù)指南：
1、選擇抗體時(shí)選擇一個(gè)單抗和一個(gè)多抗進(jìn)行配對(duì),；若選擇兩個(gè)單抗,，必須識(shí)別不同表位的抗體，從同一家公司選擇抗體對(duì),。
2,、實(shí)驗(yàn)中為了確定信號(hào)和zui低背景應(yīng)將捕獲抗體和檢測(cè)抗體在預(yù)實(shí)驗(yàn)中進(jìn)行彼此相抗的滴定。
3,、標(biāo)準(zhǔn)品的配制：對(duì)于每種細(xì)胞因子應(yīng)仔細(xì)閱讀說(shuō)明書,，注意每批的細(xì)節(jié)，在使用細(xì)胞因子前,，瞬時(shí)離心試劑瓶,，盡可能多地收回其中的細(xì)胞因子，根據(jù)每批說(shuō)明書中的細(xì)節(jié),，將凍干的細(xì)胞因子復(fù)溶,。
4、一般待測(cè)抗原標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性范圍的可通過(guò)將標(biāo)準(zhǔn)品做8次2倍系列稀釋,。
5,、為了優(yōu)化靈敏度,，建議孵育標(biāo)準(zhǔn)品和標(biāo)本,。
6,、若使用過(guò)氧化物酶作為顯色系統(tǒng)，應(yīng)嚴(yán)禁在洗液和稀釋液中加疊氮鈉,，疊氮鈉可抑制過(guò)氧化物酶的活性,。
7、當(dāng)測(cè)定混合液體中的抗原時(shí),，如血清,，建議在標(biāo)本稀釋液中加不相干的Ig。
實(shí)驗(yàn)原理：
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中大鼠核轉(zhuǎn)錄因子-κB（NF-κB）水平,。用純化的大鼠核轉(zhuǎn)錄因子-κB（NF-κB）抗體包被微孔板,，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中加入核轉(zhuǎn)錄因子-κB（NF-κB）,，再與HRP標(biāo)記的核轉(zhuǎn)錄因子-κB（NF-κB）抗體結(jié)合,，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB顯色,。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的核轉(zhuǎn)錄因子-κB（NF-κB）呈正相關(guān),。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值）,，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中大鼠核轉(zhuǎn)錄因子-κB（NF-κB）的含量。
實(shí)驗(yàn)過(guò)程必知小知識(shí)：
① 建議所有的標(biāo)準(zhǔn)品,、樣本和空白對(duì)照都做雙份檢測(cè),，取平均值，以減小實(shí)驗(yàn)誤差,。
② 若顯色過(guò)淺,，可適當(dāng)延長(zhǎng)底物溫育時(shí)。
③ 實(shí)驗(yàn)嚴(yán)格按照說(shuō)明書的操作進(jìn)行,，實(shí)驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn),。
④ 酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完，應(yīng)立即裝入密封袋中加干燥劑保存,。
⑤ 標(biāo)本宜在新鮮時(shí)檢測(cè),，如有細(xì)菌污染，菌體中可能含有內(nèi)源性HRP,，也會(huì)產(chǎn)生假陽(yáng)性反應(yīng),，保存過(guò)久可發(fā)生聚合在ELISA中可使本底加深。
⑥ 凍結(jié)標(biāo)本溶解后,，蛋白質(zhì)局部濃縮,，分布不均,，應(yīng)充分混勻宜輕緩，避免氣泡,，可上下顛混合,，不要在混勻器上強(qiáng)烈震蕩。
⑦ 渾濁或有沉淀的標(biāo)本應(yīng)先離心或過(guò)濾,，澄清后再檢測(cè),。
⑧ 反復(fù)凍融會(huì)使蛋白效價(jià)降低，所以代測(cè)樣本如需保存作多次檢測(cè),，宜少量分裝冰存,。
大鼠ELISA試劑盒B細(xì)胞淋巴瘤-XL(Bcl-xl)ELISA試劑盒 ，英文名： Bcl-xl ELISA Kit
B細(xì)胞連接蛋白(BLNK)ELISA試劑盒 ,，英文名： BLNK ELISA Kit
B細(xì)胞活化因子受體(BAFF-R)ELISA試劑盒 ,，英文名： BAFF-R ELISA Kit
B細(xì)胞活化因子(BAFF)ELISA試劑盒 ，英文名： BAFF ELISA Kit
B細(xì)胞分化因子(BCDF)ELISA試劑盒 ,，英文名： BCDF ELISA Kit
B細(xì)胞κ輕肽基因增強(qiáng)子核因子抑制因子ε(NFKBIE)ELISA試劑盒 ,，英文名： NFKBIE ELISA Kit
B-淋巴細(xì)胞趨化因子1(BLC-1/CXCL13)ELISA試劑盒 ，英文名： BLC-1/CXCL13 ELISA Kit
B淋巴細(xì)胞抗原(CD20)ELISA試劑盒 ,，英文名： CD20 ELISA Kit
BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白(Bid)ELISA試劑盒 ,，英文名： Bid ELISA Kit
Bcl-2樣蛋白1(BCL2L1)ELISA試劑盒 ，英文名： BCL2L1 ELISA Kit
Bcl-2相關(guān)X蛋白(BAX)ELISA試劑盒 ,，英文名： BAX ELISA Kit
A組鏈球菌菌壁多糖抗體(ASP)ELISA試劑盒 ,，英文名： ASP ELISA Kit
A組鏈球菌多糖抗原(ASP Ag)ELISA試劑盒 ，英文名： ASP Ag ELISA Kit
A激酶PRKA錨定蛋白12(Akap12)ELISA試劑盒 ,，英文名： Akap12 ELISA Kit
AT豐富結(jié)合域1A(ARID1A)ELISA試劑盒 ,，英文名： ARID1A ELISA Kit
ATP酶(ATP)ELISA試劑盒 ，英文名： ATP ELISA Kit
Apelin12(AP12)ELISA試劑盒 ,，英文名： AP12 ELISA Kit
Apelin 36(AP36)ELISA試劑盒 ,，英文名： AP36 ELISA Kit
apelin 13(AP13)ELISA試劑盒 ，英文名： AP13 ELISA Kit
apelin 12(AP12)ELISA試劑盒 ,，英文名： AP12 ELISA Kit
AP-5復(fù)合物β亞基(PP1030)ELISA試劑盒 ,，英文名： PP1030 ELISA Kit
Alpha-D 生育酚/維生素E(Alpha-D TPL)ELISA試劑盒 ，英文名： Alpha-D TPL ELISA Kit
Agouti相關(guān)蛋白(AGRP)ELISA試劑盒 ,，英文名： AGRP ELISA Kit大鼠ELISA試劑盒