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大鼠ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟詳解
閱讀:631 發(fā)布時間:2017-11-17大鼠ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟詳解
1:留意試劑盒保存期,,過保存期的試劑不能運(yùn)用,。
2:評價試劑的實(shí)用性,試劑的穩(wěn)定與否,,對率的高低到頭重要,。在試劑啟用前,應(yīng)進(jìn)行陰,、陽對照及樣品重復(fù)對比實(shí)驗(yàn),,斷定試劑符合要求后方可運(yùn)用。
3:嚴(yán)厲把握顯色時刻,,顯色時刻過短,,參加停止液反應(yīng)停止后,底物結(jié)合物的量過少,,易呈現(xiàn)假陰性。超過顯色要求時刻后顯色,,應(yīng)判為假陽性,,這可能與試劑本身有關(guān)。加顯色劑后當(dāng)即顯色,,不行報陽性,,這可能是本底顯色的成果。
4:加樣要、快速,。如果加樣不,,酶生成物的量不能斷定,直接影響顯色成果,。顯色的深淺及A值的測定與參加顯色劑和停止液的量有關(guān),,所以加樣應(yīng)穩(wěn)重。要求在必定時刻內(nèi)加樣結(jié)束的實(shí)驗(yàn),,如果加樣緩慢,,便呈現(xiàn)差錯,并且試劑長時刻暴露在外,,特別室溫過高時,,保存期會縮短乃至失效。
5:檢驗(yàn)技師應(yīng)具有從事實(shí)驗(yàn)室操作的基本素質(zhì)和實(shí)踐經(jīng)驗(yàn),。能嫻熟操作實(shí)驗(yàn)儀器,、器械,具有必定總結(jié)和剖析問題的才干,,對實(shí)驗(yàn)中呈現(xiàn)的意外情況能及時妥善解決,。
6:運(yùn)用校對過的微量移液器,掃除自然差錯,。移液器與否對定量檢測尤為重要,。
7:仔細(xì)閱讀說明書,嚴(yán)厲依照說明書要求進(jìn)行規(guī)范化操作,。不同批號的試劑不行混用,。值得改善的當(dāng)?shù)兀貜?fù)實(shí)驗(yàn)斷定建立后才干改善,。
8:洗刷*,,如若洗板不*,酶結(jié)合物本底顯色會呈現(xiàn)假陽性,。洗刷液要新鮮,,現(xiàn)用現(xiàn)配,陳腐的洗刷液會呈現(xiàn)本底增高現(xiàn)象,,也可能呈現(xiàn)假陽性,。
9:嚴(yán)控反應(yīng)時刻,反應(yīng)時刻過長,,酶失活,;反應(yīng)時刻過短,酶結(jié)合物不能與血清中的微生物抗原抗體充沛結(jié)合,,生成物結(jié)構(gòu)松懈不結(jié)實(shí),,容易洗掉,都可能造成假陰性。
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