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技術(shù)文章

大鼠ELISA試劑盒檢測原理

閱讀:270          發(fā)布時間:2017-9-25

大鼠ELISA試劑盒檢測原理
本試劑盒采用雙抗體兩步夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)。將標準品,、待測樣本加入到預先包被VGF神經(jīng)生長因子誘導蛋白(VGF)透明酶標包被板中,,溫育足夠時間后,洗滌除去未結(jié)合的成分,,再加入酶標工作液,,溫育足夠時間后,洗滌除去未結(jié)合的成分,。依次加入底物A,、B,底物(TMB)在辣根過氧化物酶(HRP)催化下轉(zhuǎn)化為藍色產(chǎn)物,,在酸的作用下變成黃色,,顏色的深淺與樣品中VGF神經(jīng)生長因子誘導蛋白(VGF)濃度呈正相關(guān),450nm波長下測定OD值,,根據(jù)標準品和樣品的OD值,,計算樣本中VGF神經(jīng)生長因子誘導蛋白(VGF)含量。
操作步驟
1,、準備:從冰箱取出試劑盒,,室溫復溫平衡30分鐘。
2,、配液:用蒸餾水將20倍濃縮洗滌液稀釋成原倍的洗滌液,。
3、加標準品和待測樣本:取足夠數(shù)量的酶標包被板,,固定于框架上,,分別設(shè)置標準品孔、待測樣本孔和空白對照孔,,記錄各孔位置,,在標準品孔中加入標準品50μL;待測樣本孔中先加入待測樣本10μL,,再加樣本稀釋液40μL(即樣本稀釋5倍),;空白對照孔不加。
4、溫育:37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min,。
5、洗板:棄去液體,,吸水紙上拍干,,每孔加滿洗滌液,靜置1min,,甩去洗滌液,,吸水紙上拍干,如此重復洗板4次(也可用洗板機按說明書操作洗板),。
6,、加酶標工作液:每孔加入酶標工作液50μL,空白對照孔不加,。
7,、溫育:重復4的操作。
8,、洗板:重復5的操作,。
9、顯色:每孔先加入顯色劑A 液50μL,,再加入顯色劑B液 50μL,,37℃避光顯色15min。
10,、終止:取出酶標板,,每孔加終止液50μL,終止反應(yīng)(顏色由藍色立轉(zhuǎn)黃色),。
11,、測定:以空白孔調(diào)零,在終止后15分鐘內(nèi),,用450nm波長測量各孔的吸光值(OD值),。
12、計算:根據(jù)標準品的濃度及對應(yīng)的OD值,,計算出標準曲線的直線回歸方程,,再根據(jù)樣本的OD值,在回歸方程上計算出對應(yīng)的樣品濃度,,也可以使用各種應(yīng)用軟件來計算,。zui終濃度為實際測定濃度乘以稀釋倍數(shù)。
大鼠ELISA試劑盒雞α酮戊二酸脫氫酶(α-KGDHC)ELISA Kit    英文名:    Chicken α-ketoglutarate dehy-drogenase,α-KGDHC ELISA Kit
雞α葡萄糖苷酶(α-glucosidase)ELISA Kit    英文名:    Chicken α-Glucosidase ELISA Kit
雞α干擾素(IFN-α)ELISA Kit    英文名:    Chicken Interferon α,IFN-α ELISA Kit
雞α1酸性糖蛋白(OGCHI)ELISA Kit    英文名:    Chicken alpha 1-acid glycoprotein,OGCHI ELISA kit
雞α/β水解酶域包含蛋白5(ABHD5)ELISA Kit    英文名:    Chicken alpha/beta hydrolase domain-containing protein 5,ABHD5 ELISA kit
雞Toll樣受體4(TLR4)ELISA Kit    英文名:    chicken toll-like receptor 4,TLR4 ELISA kit
雞L苯丙氨酸解氨酶(PAL)ELISA Kit    英文名:    Chicken L-Phenylalanine ammonla-lyase,PAL ELISA Kit
雞HSP90抗體(IgM)ELISA Kit    英文名:    Chicken Hsp90 antibody IgM ELISA Kit
雞HSP90抗體(IgG)ELISA Kit    英文名:    Chicken Hsp90 antibody IgG ELISA Kit
雞HSP72抗體(IgM)ELISA Kit    英文名:    Chicken Hsp72 antibody IgM ELISA Kit
雞HSP72抗體(IgG)ELISA Kit    英文名:    Chicken Hsp72 antibody IgG ELISA Kit
雞HSP60抗體(IgM)ELISA Kit    英文名:    Chicken Hsp60 antibody IgM ELISA kit
雞HSP60抗體(IgG)ELISA Kit    英文名:    Chicken Hsp60antibody IgG ELISA kit
雞HSP27抗體(IgG)ELISA ki    英文名:    Chicken Hsp27antibody IgG ELISA kit
雞HSP27 IgM 抗體ELISA Kit    英文名:    Chicken Hsp27 IgM antibody ELISA kit
雞G0/G1期開關(guān)基因(G0S2)ELISA Kit    英文名:    Chicken G0/G1 switch gene 2,G0S2 ELISA Kit
雞FAM172A蛋白(FAM172A)ELISA Kit    英文名:    Chicken Protein FAM172A,FAM172A ELISA kit
雞C反應(yīng)蛋白(CRP)ELISA Kit    英文名:    Chicken C-Reactive Protein,CRP ELISA Kit
雞CD8分子(CD8)ELISA Kit    英文名:    Chicken Cluster of differentiation 8,CD8 ELISA Kit
雞CD4分子(CD4)ELISA Kit    英文名:    Chicken Cluster of Differentiation 4,CD4 ELISA Kit
雞CD3分子(CD3)ELISA Kit    英文名:    Chicken Cluster of differentiation 3,CD3 ELISA Kit
雞5羥色銨/血清素/血清銨(5HT/ST)ELISA Kit    英文名:    Chicken 5-hydroxytryptamine/serotonin,5HT/ST ELISA kit
雞5核苷酸酶(5-NT)ELISA Kit    英文名:    Chicken 5-Nucleotidase,5-NT ELISA Kit
雞Ⅱ型膠原(Col Ⅱ)ELISA Kit    英文名:    Chicken collagen type Ⅱ,Col Ⅱ ELISA kit
雞Ⅰ型膠原N末端肽(NTX)ELISA Kit    英文名:    Chicken cross linked N-opeptide of type Ⅰ collagen,NTX ELISA Kit
雞13,14二氫15-酮前列腺素F2α(PGFM)ELISA Kit    英文名:    Chicken 13,14-dihydro-15-keto-prostaglandin F2-alpha,PGFM ELISA Kit
雞1,4,5-三磷酸肌醇(IP3)ELISA Kit    英文名:    Chicken inositol 1,4,5,-trisphosphate,IP3 ELISA kit
雞1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD glucosidase)ELISA Kit    英文名:    Chicken 1,3-βD glucosidase ELISA Kit
猴ELISA Kit    英文名:    
猴組銨(HIS)ELISA Kit    英文名:    Monkey histamine,HIS ELISA kit大鼠ELISA試劑盒

 

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