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小鼠ELISA試劑盒組織結(jié)構(gòu)
閱讀:406 發(fā)布時間:2017-8-16小鼠ELISA試劑盒組織結(jié)構(gòu):
1,、 血清:操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,。收集血液后,,1000×g離心23分鐘將血紅細胞迅速小心地分離。
2,、 血漿:EDTA,、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測,。1000×g離心60分鐘去除顆粒,。
3、 細胞上清液:1000×g離心32分鐘去除顆粒和聚合物,。
4,、 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心33分鐘,,取上清液,。
5、 保存:如果樣品不立即使用,,應將其分成小部分-70℃保存,,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血,。如果血清中大量顆粒,,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。
處理方法:
1,、血清-----室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細收集上清,。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心,。
2,、血漿-----應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,,混合10-20分鐘后,,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,。保存過程中如有沉淀形成,,應再次離心。
3,、細胞培養(yǎng)上清---檢測分泌性的成份時,,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細收集上清,。
4、組織標本-----切割標本后,,稱取重量,。加入一定量的PBS,PH7.4,。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),,或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,。分裝后一份待檢測,,其余冷凍備用,。
5,、培養(yǎng)細胞----- 檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,,細胞濃度達到100萬/ml左右,。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細收集上清,。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心,。
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