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大鼠ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟
閱讀:458 發(fā)布時(shí)間:2017-7-31大鼠ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟
1,、收集蛋白樣品(Protein sample preparation)
可以使用適當(dāng)?shù)牧呀庖毫呀赓N壁細(xì)胞、懸浮細(xì)胞或組織樣品,。對(duì)于某些特定的亞細(xì)胞組份蛋白,,例如細(xì)胞核蛋白,、細(xì)胞漿蛋白、線(xiàn)粒體蛋白等,,可以參考相關(guān)文獻(xiàn)提取這些亞細(xì)胞組份蛋白,,也可以使用試劑盒進(jìn)行抽提。
收集完蛋白樣品后,,為確保每個(gè)蛋白樣品的上樣量一致,,需要測(cè)定每個(gè)蛋白樣品的蛋白濃度。根據(jù)所使用的裂解液的不同,,需要采用適當(dāng)?shù)牡鞍诐舛葴y(cè)定方法,。因?yàn)椴煌牡鞍诐舛葴y(cè)定方法對(duì)于一些去垢劑和還原劑等的兼容性差別很大。
2,、電泳(Electrophoresis)
(1),、SDS-PAGE凝膠配制
SDS-PAGE凝膠可以參考一些文獻(xiàn)資料進(jìn)行配制,也可以使用博研生物的SDS-PAGE凝膠配制試劑盒,。該試劑盒提供了除水和配膠器具外的所有試劑以及配制各種濃度SDS-PAGE的配方,。
(2)、樣品處理
在收集的蛋白樣品中加入適量濃縮的SDS-PAGE蛋白上樣緩沖液,。例如2X或5X的SDS-PAGE蛋白上樣緩沖液,。使用5X的SDS-PAGE蛋白上樣緩沖液可以減小上樣體積,在相同體積的上樣孔內(nèi)可以上樣更多的蛋白樣品,。5X的SDS-PAGE蛋白上樣緩沖液可以參考相關(guān)文獻(xiàn)資料配制,,也可以使用我公司的SDS-PAGE蛋白上樣緩沖液(5X) 。100℃或沸水浴加熱3-5分鐘,,以充分變性蛋白,。
(3)、上樣與電泳
冷卻到室溫后,,把蛋白樣品直接上樣到SDS-PAGE膠加樣孔內(nèi)即可,。為了便于觀察電泳效果和轉(zhuǎn)膜效果,以及判斷蛋白分子量大小,,使用預(yù)染蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn),。
電泳時(shí)通常推薦在上層膠時(shí)使用低電壓恒壓電泳,而在溴酚藍(lán)進(jìn)入下層膠時(shí)使用高電壓恒壓電泳,。對(duì)于Bio-Rad的標(biāo)準(zhǔn)電泳裝置或類(lèi)似電泳裝置,,低電壓可以設(shè)置在80-100V,高電壓可以設(shè)置在120V左右,。SDS-PAGE可以采用普通的電泳儀就可以滿(mǎn)足要求,。為了電泳方便起見(jiàn),也可以采用整個(gè)SDS-PAGE過(guò)程恒壓的方式,,通常把電壓設(shè)置在100V,,然后設(shè)定定時(shí)時(shí)間為90-120分鐘,。設(shè)置定時(shí)可以避免經(jīng)常發(fā)生的電泳過(guò)頭。
大鼠ELISA試劑盒Human Interferon ω,IFN-ω ELISA Kit 人ω干擾素(IFN-ω/IFNB)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
Human interferon-inducible protein 10,IP-10 ELISA Kit 人干擾素誘導(dǎo)蛋白10(IP-10/CXCL10)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
Human interferon-inducible protein 16,IFI16/p16 ELISA Kit 人γ干擾素誘導(dǎo)蛋白16/p16(IFI16/p16)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
Human InterferonαAntibody,IFNα-Ab ELISA Kit 人抗α干擾素抗體(IFNα-Ab)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
Human Interleukin 1,,IL-1 ELISA Kit 人白介素1(IL-1)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
Human Interleukin 10,,IL-10 ELISA Kit 人白介素10(IL-10)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
Human Interleukin 11,IL-11 ELISA Kit 人白介素11(IL-11)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
Human Interleukin 12,,IL-12/P40 ELISA Kit 人白介素12(IL-12/P40)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
Human Interleukin 12,,IL-12/P70 ELISA Kit 人白介素12(IL-12/P70)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
Human Interleukin 13,IL-13 ELISA Kit 人白介素13(IL-13)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
Human Interleukin 16,,IL-16 ELISA Kit 人白介素16(IL-16)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
Human Interleukin 17,,IL-17 ELISA Kit 人白介素17(IL-17)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
Human Interleukin 18,IL-18 ELISA Kit 人白介素18(IL-18)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
Human Interleukin 1α,,IL-1α ELISA Kit 人白介素1α(IL-1α )ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
Human Interleukin 1β converting enzyme,ICE ELISA Kit 人白介素1β轉(zhuǎn)換酶(ICE)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
Human Interleukin 1β,,IL-1β ELISA Kit 人白介素1β (IL-1β)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
Human Interleukin 2,IL-2 ELISA Kit 人白介素2可溶性受體β鏈(IL-2sRβ )ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
Human Interleukin 2,,IL-2 ELISA Kit 人白介素2(IL-2)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
Human Interleukin 23,,IL-23 ELISA Kit 人白介素23(IL-23)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
human Interleukin 27,IL-27 ELISA Kit 人白介素27(IL-27)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
Human Interleukin 3,,IL-3 ELISA Kit 人白介素3(IL-3)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
Human Interleukin 4,IL-4 ELISA Kit 人白介素4(IL-4)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
Human Interleukin 5,,IL-5 ELISA Kit 人白介素-5(IL-5)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
Human Interleukin 6,,IL-6 ELISA Kit 人白介素6(IL-6)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
Human Interleukin 8,IL-8 ELISA Kit 人白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
Human Interleukin 9,,IL-9 ELISA Kit 人白介素9(IL-9)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
Human interleukin receptor associated kinase,IRAK ELISA Kit 人白介素受體相關(guān)激酶(IRAK)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
Human Interleukin-2 receptor,,IL-2R ELISA Kit 人白介素2受體(IL-2R)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
Human intestinal fatty acid binding protein,iFABP ELISA Kit 人腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
Human Intestinal trefoil factor,ITF ELISA Kit 人腸三葉因子(ITF)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
Human intrinsic factor antibody,IFA ELISA Kit 人抗內(nèi)因子抗體(IFA)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
Human Involucrin,iNV ELISA Kit 人套膜蛋白(iNV)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
Human IPO-38 ELISA Kit 人IPO-38蛋白(IPO38)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
Human Ischemia Modified Albumin,IMA ELISA Kit 人缺血修飾白蛋白(IMA)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
Human islet amyloid polypeptide,IAPP ELISA Kit 人胰島淀粉樣多肽(IAPP)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
Human islet cell antibody,ICA ELISA Kit 人胰島細(xì)胞抗體(ICA)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
Human isocitrate dehydrogenase,ICD ELISA Kit 人異檸檬酸脫氫酶(ICD)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
Human Isoprenaline Hydrochloride,iso-Hyd ELISA Kit 人異丙腎上腺素(iso-Hyd)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
Human Jo-1 Antibody,Jo1/HRS ELISA Kit 人Jo1抗體/抗組氨酰tRNA合成酶抗體(Jo1/HRS)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
Human kaliuretic peptide,KP ELISA Kit 人利鉀尿肽(KP)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
Human Kallikrein 1,KLK 1 ELISA Kit 人激肽釋放酶1(KLK 1)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
Human Kallikrein 10,KLK 10 ELISA Kit 人激肽釋放酶10(KLK 10)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
Human Kallikrein 11,KLK 11 ELISA Kit 人激肽釋放酶11(KLK 11)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T大鼠ELISA試劑盒