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技術(shù)文章

人ELISA試劑盒制備人類染色體G顯帶標(biāo)本方法

閱讀:618          發(fā)布時(shí)間:2017-2-20

人ELISA試劑盒人類染色體G顯帶標(biāo)本制備:EDTA一胰蛋白酶法

1.取25ml生理鹽水和25ml0.02%的EDTA溶液倒入立式染色缸中混勻,。
2.取2.5%的胰蛋白酶原液1ml加入到上液中混勻,,并用5%NaHCO3調(diào)pH值至7左右,。置水浴箱預(yù)溫至37℃,。
3.將染色體標(biāo)本片浸入胰蛋白酶一EDTA溶液中處理5~20秒,,同時(shí)輕輕搖動(dòng)玻片。
4.取出標(biāo)本立即浸入生理鹽水中洗兩次,。
5.浸入37℃的Giemsa染液中染色5~10分鐘,。
6.細(xì)水沖洗后晾干、鏡檢,。
胰蛋白酶法
1.將常規(guī)制備的人染色體玻片標(biāo)本(未染色的白片)置70℃烤箱中處理2小時(shí),,然后轉(zhuǎn)入37℃培養(yǎng)箱中備用,一般在第3~7天進(jìn)行顯帶,。
2.取2.5%的胰蛋白酶原液2.5ml加生理鹽水至50ml,,配成0.125%的工作液并用NaHCO3調(diào)pH值至7左3.將配好的胰蛋白酶工作液放入37℃水浴箱中預(yù)熱。
4.將玻片標(biāo)本浸入胰蛋白酶中,,不斷擺動(dòng)使胰蛋白酶的作用均勻,,處理1~2分鐘(的時(shí)間自行摸索)。
5.立即取出玻片,,放入生理鹽水中漂洗兩次,。
6.染色。將標(biāo)本浸入37℃預(yù)溫的Giemsa染液(1:10的Giemsa原液和pH6.8的磷酸緩沖液)中染色10分鐘左右,。
7.自來(lái)水沖洗(用細(xì)水小心沖洗),、晾干。
8.鏡檢顯帶效果,。人ELISA試劑盒在低倍鏡下選擇分散良好的長(zhǎng)度適中的分裂相轉(zhuǎn)換油鏡觀察,若染色體未出現(xiàn)帶紋,,則為顯帶不足,;若染色體邊緣發(fā)毛為顯帶過(guò)頭,此時(shí)應(yīng)根據(jù)具體情況增減胰蛋白酶處理時(shí)間重新處理一張標(biāo)本,。
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