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人ELISA試劑盒試驗原理
閱讀：151 發(fā)布時間：2016-12-2人ELISA試劑盒人色素上皮衍生因子ELISA試劑盒本試劑僅供研究使用
標本：血清或血漿
試驗原理：
PEDF試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗（ELISA）.已知PEDF濃度的標準品,、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測,。先將PEDF和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,，加入親和素標記過的HRP,。再經過溫育和洗滌，去除未結合的酶結合物,，然后加入底物A,、B，和酶結合物同時作用,。產生顏色,。顏色的深淺和樣品中PEDF的濃度呈比例關系。
操作步驟
使用前,，將所有試劑充分混勻,。不要使液體產生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡,，產生加樣上的誤差,。
根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔,。每個樣品根據自己的數量來定,，能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應孔內,。
加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔,、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體,。蓋上膜板,，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時,。
甩去孔內液體,，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒,，甩去洗滌液,，用吸水紙拍干。重復此操作3次,。如果用洗板機洗滌,，洗滌次數增加一次。
每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,，輕輕振蕩混勻,，37℃溫育30分鐘,。
甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液,，振蕩30秒,，甩去洗滌液，用吸水紙拍干,。重復此操作3次,。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次,。
每孔加入底物A,、B各50ul，輕輕振蕩混勻,，37℃溫育10分鐘,。避免光照。
取出酶標板,，迅速加入50ul終止液,，加入終止液后應立即測定結果。
在450nm波長處測定各孔的OD值,。
6號標準品以上的結果為非線性的,，根據此標準曲線無法得到的結果。
人ELISA試劑盒人色素上皮衍生因子ELISA試劑盒結果判斷與分析
1,、儀器值：于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值
2,、以吸光度OD值為縱坐標（Y），相應的PEDF標準品濃度為橫坐標（X）,，做得相應的曲線,，樣品的PEDF含量可根據其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。
3,、檢測值范圍：0-800ng/ml
4,、敏感度： 1.0 ng/ml
碳酸二丙酯 英文名(EN)： Dipropyl carbonate,99% CAS No.： 623-96-1 規(guī)格(SP)： 1G 類別(Key)： 通用試劑
丙二酸二異丙酯 英文名(EN)： Diisopropyl malonate,99% CAS No.： 13195-64-7 規(guī)格(SP)： 25ML 類別(Key)： 通用試劑
氰乙酸甲酯 英文名(EN)： Methyl cyanoacetate,99% CAS No.： 105-34-0 規(guī)格(SP)： 100G 類別(Key)： 通用試劑
肉桂酸芐酯 英文名(EN)： Benzyl cinnamate,≥98% CAS No.： 103-41-3 規(guī)格(SP)： 100G 類別(Key)： 通用試劑
乙酸異辛酯 英文名(EN)： 2-Ethylhexyl acetate,≥99% CAS No.： 103-09-3 規(guī)格(SP)： 500ML 類別(Key)： 通用試劑
對苯二甲酸二辛酯 英文名(EN)： Dioctyl terephthalate,≥96% CAS No.： 6422-86-2 規(guī)格(SP)： 500ML 類別(Key)： 通用試劑
2-氯丙酸甲酯 英文名(EN)： Methyl 2-chloropropionate,97% CAS No.： 17639-93-9 規(guī)格(SP)： 25G 類別(Key)： 通用試劑
對羥基苯乙酸甲酯 英文名(EN)： Methyl 4-Hydroxyphenylacetate,99% CAS No.： 14199-15-6 規(guī)格(SP)： 25G 類別(Key)： 通用試劑
乙酸芳樟酯 英文名(EN)： Linalyl Acetate,≥97% CAS No.： 115-95-7 規(guī)格(SP)： 25G 類別(Key)： 通用試劑
人ELISA試劑盒