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胎牛血清的凍存和復蘇的過程詳解
閱讀：682 發(fā)布時間：2024-5-22
胎牛血清是一種常用的細胞培養(yǎng)添加劑，它提供細胞生長必需的營養(yǎng)物質,、生長因子和附著因子,。為了確保FBS的長期保存和使用效果，正確的凍存和復蘇操作至關重要,。以下是關于胎牛血清凍存和復蘇的詳細描述：
1. 胎牛血清的接收與檢查：
- 在接收新的FBS時,，應檢查外包裝是否完好無損，以確保無菌條件,。
- 確認血清的生產日期,、有效期和批次號，以便追溯和質量控制,。
2. 凍存前的準備工作：
- 在凍存前,，FBS應存放在2-8°C的冰箱中，避免反復凍融,，因為這會影響血清中的蛋白質和其他成分的穩(wěn)定性,。
- 準備適量的無菌凍存管或瓶子，并確保它們的密封性能良好,。
3. 分裝與標記：
- 根據使用需求,，將FBS分裝到準備好的凍存管中，避免一次性解凍大量血清,，以減少反復凍融對血清質量的影響,。
- 在每個凍存管上清晰標記血清的批次號,、分裝日期和有效期，以便使用時能夠追溯,。
4. 凍存方法：
- 將分裝好的FBS放入-20°C冰箱中預凍數小時,，然后轉移到-80°C超低溫冰箱或液氮罐中長期保存。
- 確保凍存過程中溫度的逐漸降低,，避免快速冷凍導致的血清成分變性,。
5. 復蘇(解凍)步驟：
- 在使用FBS前，將其從凍存環(huán)境中取出,，并在2-8°C的冰箱中緩慢解凍,，通常需要過夜。
- 避免在室溫下長時間放置,，以防細菌污染和血清成分的變化,。
- 也可以將凍存管置于37°C水浴中快速解凍，但需注意防止水浴的污染,。
6 使用與再凍存
- 解凍后的FBS應在解凍當天使用,，以保證其生物活性和營養(yǎng)成分的完整性。
- 如果一次未使用完,，可以將剩余的FBS重新凍存，但應注意避免反復凍融,，因為這會降低血清的質量,。
7. 注意事項：
- 在整個凍存和復蘇過程中，應嚴格遵守無菌操作規(guī)程,，以防止微生物污染,。
- 使用無菌的移液工具和容器，避免交叉污染,。
- 定期檢查凍存設備的溫度記錄,，確保凍存環(huán)境穩(wěn)定。
8質量控制：
- 在使用新批次的FBS之前,，建議進行小規(guī)模的細胞培養(yǎng)試驗,，以評估血清的質量和適用性。
- 記錄每次凍存和復蘇的詳細信息,，包括日期,、時間和使用情況，以便在出現問題時進行追溯,。