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上海島韓實(shí)業(yè)有限公司
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細(xì)胞培養(yǎng)箱所需的實(shí)驗(yàn)室設(shè)備的種類
2015-11-23 閱讀(2728)
對細(xì)胞培養(yǎng)箱所需的實(shí)驗(yàn)室設(shè)備的種類和使用建議,，也有一定的標(biāo)準(zhǔn)和規(guī)范：細(xì)胞培養(yǎng)主要重點(diǎn)在于保持無菌操作，避免微生物及其他有害因素的影響,。
1.顯微鏡：倒置式顯微鏡是細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室日常工作常規(guī)*設(shè)備,，主要用于日常了解細(xì)胞的生長情況并觀察有無污染發(fā)生。如資金允許,，建議選用配置有照相系統(tǒng)的高品質(zhì)相差顯微鏡,、解剖顯微鏡、熒光顯微鏡,、錄像系統(tǒng)或縮時電影拍攝裝置等,，可隨時拍攝并記錄細(xì)胞生長情況。
超凈工作臺：目前絕大部分細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室使用超凈工作臺實(shí)現(xiàn)無菌操作,，具有操作簡單、安裝方便,、占用空間小且凈化效果很好,。超凈工作臺主要有兩種——側(cè)流式（垂直式）和外流式（水平層流式）。工作原理一般是將室內(nèi)空氣經(jīng)粗過濾器初濾,，由離心風(fēng)機(jī)壓入靜壓箱,，再經(jīng)空氣過濾器精濾，由此送出的潔凈氣流以一定的均勻的斷面風(fēng)速通過無菌區(qū),，從而形成無塵無菌的高潔凈度工作環(huán)境,。
2.（1）側(cè)流式工作臺：空氣凈化后的氣流由左或右側(cè)通過工作臺面流向?qū)?cè),，也有從上向下或從下向上流向?qū)?cè),，形成氣流屏障保持工作區(qū)無菌，工作臺結(jié)構(gòu)為封閉式,；
?。?）外流式工作臺：凈化后的空氣面向操作者流動，因而外方氣流不致混入操作,，工作臺結(jié)構(gòu)為開放式,，但進(jìn)行有害物質(zhì)實(shí)驗(yàn)操作對操作者不利。超凈工作臺應(yīng)需要定期請有關(guān)部門檢查潔凈度，符合要求的超凈工作臺其潔凈度應(yīng)達(dá)到100級,，用塵埃粒子計(jì)數(shù)儀檢測粒徑≤5μm的塵埃粒子數(shù)量不應(yīng)超過3.5個/L,；空氣流量應(yīng)控制在0.75-1.0m3/s；細(xì)菌菌落數(shù)平均<1個,，根據(jù)無菌狀況必要時需要置換過濾器,。
3.培養(yǎng)箱：體外培養(yǎng)的細(xì)胞和體內(nèi)細(xì)胞一樣，需要在恒定的溫度下生存,，一般zui適生長溫度為37℃,，溫差變化不應(yīng)超過±0.5℃。溫度升高2℃時,，變不利于細(xì)胞生存,，溫度達(dá)到40℃以上細(xì)胞將很快死亡。因此,，可控溫的恒溫培養(yǎng)箱,、CO2培養(yǎng)箱是選擇。
?。?）恒溫培養(yǎng)箱：應(yīng)選隔水式或晶體管式自控溫培養(yǎng)箱,，此類培養(yǎng)箱靈敏度高，溫度控制較穩(wěn)定,。一般的恒溫培養(yǎng)箱價格較便宜,，其缺點(diǎn)是只宜于作密閉式培養(yǎng)。
?。?）CO2培養(yǎng)箱：目前多數(shù)的細(xì)胞培養(yǎng)室已廣泛使用,。CO2培養(yǎng)箱的優(yōu)點(diǎn)是能夠提供進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時所需要的一定量的CO2（常用濃度為5％），易于穩(wěn)定培養(yǎng)液pH,，適用于開放或半開放培養(yǎng),。使用培養(yǎng)瓶時，為使培養(yǎng)瓶內(nèi)與外界保持通氣狀態(tài),，可將瓶蓋略微旋松,，為避免細(xì)胞被污染，使用這種培養(yǎng)方式時,，培養(yǎng)箱內(nèi)空氣必須保持清潔,，需定期用紫外線照射或酒精消毒，同時培養(yǎng)箱內(nèi)應(yīng)放置盛有無菌蒸餾水的水槽,，防止培養(yǎng)液蒸發(fā),，保持箱內(nèi)相對濕度在100%。
?。?）細(xì)胞培養(yǎng)耗材：培養(yǎng)細(xì)胞的器皿可用培養(yǎng)皿,、培養(yǎng)板或培養(yǎng)瓶，萊貝在本篇不做詳細(xì)介紹，這部分知識會在實(shí)驗(yàn)室耗材知識部分作重點(diǎn)介紹,。
4.烘箱（干燥箱）：用于細(xì)胞培養(yǎng)的一些器械,、器皿必須烘干后才能使用，玻璃器皿等須干熱消毒,。干熱消毒時,，烘箱內(nèi)溫度一般要達(dá)到160℃以上，通常使用鼓風(fēng)式烘箱,。其優(yōu)點(diǎn)是溫度均勻,、效果較好，缺點(diǎn)是升溫過程較慢,。升溫時不能先升溫后鼓風(fēng)而應(yīng)鼓風(fēng)與升溫同時開始,，至100℃時，停止鼓風(fēng),。需注意避免包裹器皿的紙或棉花燒焦,，燒焦的碎屑可影響細(xì)胞的生長。消毒后不能立即打開箱門,，以免驟冷導(dǎo)致玻璃器皿破裂,，應(yīng)等溫度自然下降至100℃以下后可開門。
5.水純化裝置：細(xì)胞培養(yǎng)對水的質(zhì)量要求較高,，細(xì)胞培養(yǎng),、細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)液體的配制用水以及清洗細(xì)胞培養(yǎng)器皿用水都必須事先經(jīng)過嚴(yán)格的純化處理。目前有多種純化方法相結(jié)合,，可使普通水純化為純水和超純水的純水裝置使用非常靈活方便,，可掛壁式、臺式,、可配儲水箱、也可直接用分液槍,、還可根據(jù)各類實(shí)驗(yàn)用水要求選擇配置殺菌功能,，有效去除DNA酶、RNA酶,、蛋白酶等,，更有可有效去除掉熱源、內(nèi)毒素的超濾型純水裝置,。
6.冰箱：細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室*設(shè)備,，應(yīng)，不得存放易揮發(fā),、易燃燒等對細(xì)胞有害的物質(zhì),，且應(yīng)保持清潔。一般包括普通冰箱、低溫冰箱和超低溫冰箱,。（1）普通冰箱：儲存培養(yǎng)液,、生理鹽水、Hanks液試劑等培養(yǎng)用的物品,，可短期保存組織樣本,。（2）-20℃低溫冰箱、超低溫冰箱：用于儲存需要冷凍以保持生物活性以及需長時期存放的制劑,，如酶,、血清等。
7.細(xì)胞冷凍儲存器：儲存器常用的液氮容器,，根據(jù)使用需要分為不同類型和規(guī)格,。選擇液氮容器時需要考慮三個因素：容積大小、取放使用方便,、液氮揮發(fā)量,。液氮容器的大小一般在25-500L，可以儲存1ml的安瓿250-15000個左右,。液氮溫度zui低文帝可達(dá)-196℃,，使用時應(yīng)注意避免凍傷。由于液氮易揮發(fā),，需注意觀察剩余液氮量,，及時補(bǔ)充，避免液氮不足使細(xì)胞受損或死亡,。目前有許多智能型細(xì)胞冷凍儲存器可供選擇,，可配置有電子控制器的液氮儲存器，實(shí)現(xiàn)凍存自動化,；并可監(jiān)測液氮水平和樣品溫度,，確保樣品溫度始終處于設(shè)定溫度點(diǎn)；可配置報(bào)警系統(tǒng),，設(shè)置液氮液面,、溫度、電池,、電壓,、電源等失常情況下報(bào)警；同時具備熱氣體旁路系統(tǒng),，防止高于-130℃的暖空氣進(jìn)入液氮罐,，從而更有效地保護(hù)樣品，防止容器內(nèi)升溫,。另外,，可選擇液氮供應(yīng)罐通過連接管給儲存罐補(bǔ)充液氮,，保證樣品安全。
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