購買國外細胞株需要考慮的因素有如下幾點:1,、細胞株的生物等級,,由于有些細胞株及菌株屬于管制品,所以從國外購貨比較麻煩,。2,、在購買國外細胞株時,需交待國外加比較多的干冰(一般在13公斤以上,,采用比較密封的泡沫盒加套紙箱),。 293F細胞,上海乾思生物公司細胞近3000種,,來源于美國ATCC,細胞都是經(jīng)過嚴格質(zhì)量控制,,在中國大陸努力搭建正牌細胞與國內(nèi)廣大科研人員之間的溝通橋梁。293F細胞外,,還有更多相關(guān)實驗產(chǎn)品,,標準品,細胞株和實驗技術(shù)服務(wù)等等前期后續(xù)服務(wù),?!?/font>
293F細胞* 細胞凍存 *
目前細胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護劑,這兩種物質(zhì)能提高細胞膜對水的通透性,,加上緩慢冷凍可使細胞內(nèi)的水分滲出細胞外,,減少細胞內(nèi)冰晶的形成,從而減少由冰晶形成的細胞損傷,。
1,、10%的DMSO+90%胎牛血清。甘油一般用于菌種保存很少用于細胞凍存,。
2,、取對數(shù)生長期的細胞,,用胰蛋白酶把單層生長的細胞消化下來,懸浮生長的細胞則直接將細胞移至15ml離心管中,。
3,、離心1000 rpm,5 min。
4,、去除胰蛋白酶及舊的培養(yǎng)液,,加入適量配制好的凍存培養(yǎng)液,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,,計數(shù),,調(diào)節(jié)凍存液中細胞的zui終密度為5x10^6/ml~1x10^7/ml。
5,、 在凍存管上標明細胞的名稱,,凍存時間及操作者。
6,、凍存:標準的凍存程序為降溫速率-1~-2℃/min,;當(dāng)溫度達到-25℃以下時,可增至-5℃~-10℃/min,;到-100℃時,,則可迅速浸入液氮中。也可將裝有細胞的凍存管放入-20℃冰箱2h,,然后放入-70℃冰箱中過夜,,取出凍存管,移入液氮容器內(nèi),。
購買上海乾思物細胞注意事項(乾思生物)發(fā)布
一、客戶收到細胞先不開蓋,,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞時的培養(yǎng)基拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,,顯微鏡下拍細胞100X,,200X各一張),排除細胞本身污染的情況,;
收到細胞未開封,,出現(xiàn)污染狀況我們負責(zé)免費發(fā)送一株細胞。
二,、如為貼壁細胞,,請在顯微鏡下觀察細胞密度:
1. 未超過80%匯合度時,用75%酒精(建議配置75%酒精的水也是滅菌超純水,,噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內(nèi),,嚴格無菌操作,;然后打開蓋子,先用槍頭把培養(yǎng)基吸出10ml左右,,放在離心管里,,然后瓶口過火(嚴禁直接傾倒),這樣可以保證不污染,,再用10ml的移液管,,將剩余的培液全部吸出,放于離心管中,,培養(yǎng)瓶中只剩余10ml左右培液就可以了,。培養(yǎng)16hr(時間根據(jù)細胞生長情況調(diào)整)之后,傳代或者凍存,。
2. 超過80%匯合度時,,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。具體步驟如下:
1) 棄去培養(yǎng)液,,用3ml PBS(不含鈣,,鎂離子)洗1-2次;
2) 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于T25培養(yǎng)瓶中,,倒轉(zhuǎn)放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱,,然后又將培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)大約30秒后,在倒置顯微鏡下觀察細胞消化情況,,若細胞大部分變圓分散,,輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶,細胞隨即脫落下來,;
3) 加入6-8ml*培養(yǎng)基,,吸出,分到新的培養(yǎng)瓶中,,按要求分瓶,。
三、如為懸浮細胞,,吸出培養(yǎng)液,,1000轉(zhuǎn)/分鐘離心5分鐘,吸出上清,,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶,。
注意:換液時一半用我們的培養(yǎng)基,一半用你們的,,以免細胞不適應(yīng)而造成生長不好,。
四、細胞出現(xiàn)問題,可重發(fā)的情況有哪些,?判定標準是什么,?
(1)細胞運輸途中遭遇的各種問題,,細胞丟失,、破損、漏液等,,重發(fā),;
(2)凍存的細胞復(fù)蘇后,,絕大多數(shù)細胞未存活,,重發(fā);
?。?)存活的細胞靜置24小時后,,絕大多數(shù)細胞未存活,重發(fā),;
?。?)凍存的細胞復(fù)蘇后或存活的細胞靜置4小時后并且未開封,出現(xiàn)污染,,重發(fā),;
(5)視具體情況而定,。
五,、細胞出現(xiàn)問題,不予以重發(fā)的情況有哪些,?
?。?)客戶造成細胞污染,不重發(fā),;
?。?)客戶不正確操作致細胞狀態(tài)不好,不重發(fā),;
(3)細胞狀態(tài)不好,,未提供細胞培養(yǎng)前3天照片的,,不重發(fā);
?。?)細胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理的,,不重發(fā);
(5)細胞收到2天內(nèi),,未告知,,不重發(fā);
?。?)視具體情況而定,。
六、售后服務(wù)政策
Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌,;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨,,超低比價,另常備 Trizol DMSO lipo2000 lipo3000 SC-2004 SC-2005常備現(xiàn)貨 ,;貨期短,,價格優(yōu),售后齊全,。
細胞污染問題,,請在收到產(chǎn)品48小時內(nèi),給我們提出真實的實驗結(jié)果,;細胞活性問題,,請在收到產(chǎn)品7天內(nèi)給我們提出真實的實驗結(jié)果,我們調(diào)查核實后予免費調(diào)換,,不收取任何費用,。
需要客戶關(guān)于293F細胞細胞培養(yǎng)說明、細胞操作處理方法,、細胞質(zhì)量問題反饋表,。
如用戶收到細胞8-30天之內(nèi),因處理不當(dāng)造成細胞死亡或污染,,我公司將優(yōu)惠價重新提供一株原細胞
293F細胞質(zhì)量可靠,,售后有保障
★我?guī)旒毎?000種,來源于美國ATCC,細胞都是經(jīng)過嚴格質(zhì)量控制,。
凍存細胞時間為5-7個工作日,,活細胞為7-15個工作日。
★由于細胞庫現(xiàn)有細胞類目多,,為了不出現(xiàn)混亂錯誤,,需要了解293F細胞相關(guān)細胞價格及詳細資料請老師,對您造成的不便還請見諒,!
(編輯:tanxi)