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關(guān)鍵詞:Pellicular
簡(jiǎn)介:我公司全國(guó)總代理,華東地區(qū)代理Pellicular專業(yè)經(jīng)營(yíng)進(jìn)口胎牛血清,、細(xì)胞因子,、ELISA試劑盒、細(xì)胞,、抗體,、生物試劑、耗材,、培養(yǎng)基,、一抗,、二抗、其產(chǎn)品吸附均勻,,吸附性好,,空白值低,孔底透明度高,,代做ELISA實(shí)驗(yàn)等,。
全國(guó)總代理,華東地區(qū)代理產(chǎn)品涉及分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué),、細(xì)菌學(xué),、遺傳學(xué)、免疫學(xué),、生物化學(xué),、蛋白質(zhì)學(xué)、細(xì)胞療,、臨床應(yīng)用等領(lǐng)域,。全國(guó)總代理,華東地區(qū)代理范圍內(nèi)免費(fèi)運(yùn)輸,如出現(xiàn)運(yùn)輸質(zhì)量問(wèn)題,,我們可以包退換貨,。完善的庫(kù)存及供應(yīng)體系以及高效穩(wěn)定的純化技術(shù),保證產(chǎn)品均能現(xiàn)貨供應(yīng)和產(chǎn)品質(zhì)量的穩(wěn)定性,。
品牌名稱:
測(cè)序?qū)嶒?yàn)流程:
分子克隆的相關(guān)載體:DNA段的克隆需要合適的載體,,載體或是質(zhì)粒,或是噬菌體,,或是病毒,,通常大多經(jīng)過(guò)人工改造。作為載體必須具備兩條件:一是該載體在細(xì)胞內(nèi)必須能自主復(fù)制,,即必須具備復(fù)制原點(diǎn),;二是該載體必須具備適合的酶切位點(diǎn),且這些酶切位點(diǎn)不在復(fù)制原點(diǎn)區(qū)域內(nèi),。以上兩條,,保證了載體的可繁殖性和可利用性。為了便于獲得陽(yáng)隆克隆,,載體上常有篩選標(biāo)記,,如對(duì)抗菌素的抗性,某些基因產(chǎn)物的顯色反應(yīng)等,。
服務(wù)要求:
1,、請(qǐng)以等形式告知我們服務(wù)的主要目的及具體要求。
2、提供外源DNA的來(lái)源及背景資料,。DNA來(lái)源包括:PCR擴(kuò)增產(chǎn)物,;RT-PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;從其它質(zhì)粒上酶切得到的DNA段等,。
3,、提供DNA段的電泳照片,并請(qǐng)標(biāo)明Marker有濃度,。
4,、提供載體來(lái)源與背景資料。
5,、注明克隆使用的酶切位點(diǎn)以及是否需要平端連接等,。
相關(guān)材料說(shuō)明:
1、對(duì)于實(shí)驗(yàn)材料中涉及病原體等危險(xiǎn)材料不接受,。
2,、實(shí)驗(yàn)中涉及的堿基序列請(qǐng)以的形式發(fā)到我中心。
3,、實(shí)驗(yàn)中的使用載體要盡量提供背景資料:(質(zhì)粒大小,,抗性,拷貝數(shù),,多克隆位點(diǎn)等)如果是商品化載體,,請(qǐng)您提供生產(chǎn)廠家及標(biāo)準(zhǔn)名稱;如果所提供載體是您自己構(gòu)建的請(qǐng)注明大體結(jié)構(gòu)情況,。
4,、我中心可以提供常用的如(氨芐青霉素,氯霉素,,卡那霉素)以外的抗生素需您提供,。
5、您自己提供的引物如果為干品,,請(qǐng)您標(biāo)注具體的OD數(shù),,如果是液體態(tài),請(qǐng)您標(biāo)明濃度,。
6,、可以用甘油菌和穿刺菌形式郵寄菌體,。(同時(shí)提供相應(yīng)的質(zhì)粒),;如果提供質(zhì)粒,則質(zhì)粒的量在4ug以上,;如果提供的是PCR產(chǎn)物,,則PCR產(chǎn)物量在5u以上(附上電泳圖)
7、用于提取RNA/DNA的材料要新鮮。采樣時(shí)應(yīng)首先在液氮中速凍,,保存在-80度的冰箱中,,使用干冰運(yùn)輸。
載體DNA的選擇
分子克隆載體
①質(zhì)粒:質(zhì)粒是細(xì)菌染色體外遺傳因子,,DNA呈環(huán)狀,,大小為1-200千堿基對(duì)(kb)。在細(xì)胞中以游離超螺旋狀存在,,很容易制備,。質(zhì)粒DNA可通過(guò)轉(zhuǎn)化引入寄主菌。在細(xì)胞中有兩種狀態(tài),,一是"緊密型";二是"松弛型",。此外還應(yīng)具有分子量小,易轉(zhuǎn)化,,有一至多個(gè)選擇標(biāo)記的特點(diǎn),。質(zhì)粒型載體一般只能攜帶10kb以下的DNA段,適用于構(gòu)建原核生物基因文庫(kù),,cDNA庫(kù)和次級(jí)克隆,。
②噬菌體DNA:常用的λ噬菌體的DNA是雙鏈,長(zhǎng)約49kb,,約含50個(gè)基因,,其中50%的基因?qū)κ删w的生長(zhǎng)和裂解寄主菌是必需的,分布在噬菌體DNA兩端,。中間是非必需區(qū),,進(jìn)行改造后組建一系列具有不同特點(diǎn)的載體分子。λ載體系統(tǒng)zui適用于構(gòu)建真核生物基因文庫(kù)和cDNA庫(kù),。
M13噬菌體是一種*的載體系統(tǒng),,它只能侵襲具有F基因的大腸桿菌,但不裂解寄主菌,。M13DNA(RF)在寄主菌內(nèi)是雙鏈環(huán)狀分子,,象質(zhì)粒一樣自主復(fù)制,制備方法同質(zhì)粒,。寄主菌可分泌含單鏈DNA的M13噬菌體,,又能方便地制備單鏈DNA,用于DNA順序分析,、定點(diǎn)突變和核酸雜交,。
③柯斯(Cos)質(zhì)粒:是一類帶有噬菌體DNA粘性末端順序的質(zhì)粒DNA分子。是噬菌體-質(zhì)?;旌衔?。此類載體分子容量大,可攜帶45kb的外源DNA段。也能象一般質(zhì)粒一樣攜帶小片段DNA,,直接轉(zhuǎn)化寄主菌,。這類載體常被用來(lái)構(gòu)建高等生物基因文庫(kù)。
【生物分子】 抗生素/抗真菌素 維生素 氨基酸 核苷酸 脂 糖類 白三烯 前列腺素 藥物結(jié)合物 抗氧化劑 藥理活性化合物 類固醇激素結(jié)合物 半抗原反應(yīng) 半抗原載體結(jié)合物 放射性核素 血小板活化素 tRNA 活性染料和化合物 親和素/鏈霉親和素
【蛋白質(zhì)/抗原/多肽】 免疫球蛋白 封閉肽 人蛋白和抗原 小鼠蛋白和抗原 細(xì)菌蛋白和抗原 病毒蛋白和抗原 植物蛋白和抗原 其它蛋白和抗原 細(xì)胞質(zhì)蛋白 總蛋白 膜蛋白 核蛋白 細(xì)胞裂解和提取物 線粒體蛋白 細(xì)胞裂解 組織提取 重組細(xì)胞因子
【常用生化試劑】EDTA DTT Tris SDS MOPS HEPES 水 分子生物學(xué)緩沖液 蛋白生化緩沖液 去垢劑 染色試劑 溶劑 酸堿 化學(xué)試劑 其它生化試劑
【PCR/RT-PCR/qPCR】PCR試劑 PCR對(duì)照 特異性PCR試劑盒 PCR克隆試劑盒 RNA 載體及構(gòu)建 PCR克隆載體 M13克隆載體 細(xì)菌克隆載體 文庫(kù)及構(gòu)建 cDNA文庫(kù) 基因組文庫(kù) 噬菌體展示文庫(kù)
【酶】限制性內(nèi)切酶 蛋白酶 核酸酶 激酶 聚合酶 連接酶
【cDNA及合成純化】cDNA全長(zhǎng)基因 RNA cDNA合成 cDNA相關(guān)試劑
【核酸/蛋白合成】Oligo純化 核酸合成柱 核酸合成試劑
【克隆與表達(dá)】克隆基因