hiPSC人誘導多功能干細胞來源于ATCC,,是將健康男性新生兒包皮細胞誘導成hiPSC,貼壁生長,,呈克隆狀,,可在hESC/iPSC完Q培養(yǎng)基中快速增殖,而邊緣分化的細胞則在該培養(yǎng)基中生長較慢,,從而選擇性擴增并獲得高純度人多能干細胞,。
細胞培養(yǎng)信息:
細胞名稱:hiPSC人誘導多功能干細胞
細胞別稱:hiPSC;人類誘導多能干細胞,;人多能干細胞
細胞來源:肝癌
生長特性: 貼壁生長
培養(yǎng)條件: mTeSR™1
細胞含量:1×10?
細胞規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
細胞用途:僅供科研使用,。
hiPSC細胞培養(yǎng)注意事項:
1、不同品牌胰酉每消化時間差別較大,,注意嚴格控制消化時間
2,、消化傳代細胞時吹打細胞注意盡量輕柔,不要產生過多氣泡以免影響細胞狀態(tài)
3,、凍存液現(xiàn)用先配
運輸和保存:
1,、1mL凍存管包裝干冰運輸,,收到后-80度冰箱保存過夜后轉入液氮或直接復蘇,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈,、凍存管瓶蓋脫落,、破損及細胞有污染,請立即與我們聯(lián)系,。
2,、T25瓶復蘇的存活細胞常溫發(fā)貨,收到后按照細胞接收后的處理方法操作,。
細胞到貨須知
1. 請客戶收到本公司原代細胞產品后,,立即對物品包裝、細胞培養(yǎng)瓶等拍照,,如有疑問或問題,,須在24小時內通知本公司,提供照片和書面說明,??蛻羰盏椒莾龃嬖毎螅?5%酒精擦拭瓶身,,再將原裝的原代細胞瓶放入細胞培養(yǎng)箱內培養(yǎng),,1-4小時后再使用,吸取瓶中培養(yǎng)液,,換6ml完Q培養(yǎng)液,。注意觀察細胞情況,待貼壁率達到90%以上再按傳代說明操作,。請客戶使用T25細胞瓶傳代,,一瓶傳二瓶。
2. 謹記:培養(yǎng)原代細胞前三天,,需對原代細胞生長狀態(tài)進行拍照并注明和標記時間,。若原代細胞培養(yǎng)生長存在質量問題,需向本公司提供原代細胞培養(yǎng)生長的照片和書面說明,。請客戶使用原代細胞第3代以內,。原代細胞培養(yǎng)傳代過多,可能造成原代細胞的質量問題,。
細胞培養(yǎng)
1.顧客收到T25瓶裝的細胞如果沒長滿,,建議先放培養(yǎng)箱2-4小時
2.吸去培養(yǎng)液,取部分放入50ml離心管,,放置于培養(yǎng)箱(放2-3天,,觀察是否有污染)
3.加PBS清洗1-2遍,去PBS。加6ml完Q培養(yǎng)基放培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng),。1-2天換一次液(如果培養(yǎng)液變黃,,必須盡快換液)
細胞傳代
1.細胞密度到達90%,可以進行傳代,。
2.吸去培養(yǎng)液,,加PBS清洗1-2遍,,去PBS,。加入0.25%胰酉每1.5ml潤洗10秒,
3.加12ml完 Q培養(yǎng)基,,吹打均勻,,即可分到2個T25培養(yǎng)瓶里。(原代細胞1傳2,,若顧客使用培養(yǎng)皿或培養(yǎng)孔板,,建議先包被)
細胞凍存
1.選擇指數(shù)生長期的細胞,吸去培養(yǎng)液,,加PBS清洗1-2遍,。去PBS,加入0.25%胰酉每1.5ml潤洗10秒,,去胰酉每,。將培養(yǎng)瓶放37度培養(yǎng)箱,靠殘余胰酉每繼續(xù)消化細胞直至細胞變圓,,拍打瓶側使細胞脫落,。
2.加1-1.5ml成品凍存液(本公司有賣的,無血清低DMSO,,無需程序凍存),,分裝至2ml凍存管里,放-80度冰箱過夜,。第二天再轉至液氮
細胞復蘇
1.從液氮罐取凍存管,,凍存管放置37度水浴鍋1min,至凍存液融解。
2.在超凈臺將凍存液吸取至T25培養(yǎng)瓶,,再加入10-15ml完Q培養(yǎng)基
3.第二天換6ml完Q培養(yǎng)液即可