hiPSC人誘導(dǎo)多功能干細(xì)胞來源于ATCC,是將健康男性新生兒包皮細(xì)胞誘導(dǎo)成hiPSC,,貼壁生長,,呈克隆狀,可在hESC/iPSC完Q培養(yǎng)基中快速增殖,,而邊緣分化的細(xì)胞則在該培養(yǎng)基中生長較慢,,從而選擇性擴(kuò)增并獲得高純度人多能干細(xì)胞。
細(xì)胞培養(yǎng)信息:
細(xì)胞名稱:hiPSC人誘導(dǎo)多功能干細(xì)胞
細(xì)胞別稱:hiPSC;人類誘導(dǎo)多能干細(xì)胞;人多能干細(xì)胞
細(xì)胞來源:肝癌
生長特性: 貼壁生長
培養(yǎng)條件: mTeSR™1
細(xì)胞含量:1×10?
細(xì)胞規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
細(xì)胞用途:僅供科研使用,。
hiPSC細(xì)胞培養(yǎng)注意事項(xiàng):
1,、不同品牌胰酉每消化時(shí)間差別較大,注意嚴(yán)格控制消化時(shí)間
2,、消化傳代細(xì)胞時(shí)吹打細(xì)胞注意盡量輕柔,不要產(chǎn)生過多氣泡以免影響細(xì)胞狀態(tài)
3、凍存液現(xiàn)用先配
運(yùn)輸和保存:
1,、1mL凍存管包裝干冰運(yùn)輸,,收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈,、凍存管瓶蓋脫落,、破損及細(xì)胞有污染,請立即與我們聯(lián)系,。
2,、T25瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨,收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作,。
細(xì)胞到貨須知
1. 請客戶收到本公司原代細(xì)胞產(chǎn)品后,,立即對物品包裝、細(xì)胞培養(yǎng)瓶等拍照,,如有疑問或問題,,須在24小時(shí)內(nèi)通知本公司,提供照片和書面說明,??蛻羰盏椒莾龃嬖?xì)胞后,用75%酒精擦拭瓶身,,再將原裝的原代細(xì)胞瓶放入細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),,1-4小時(shí)后再使用,吸取瓶中培養(yǎng)液,,換6ml完Q培養(yǎng)液,。注意觀察細(xì)胞情況,待貼壁率達(dá)到90%以上再按傳代說明操作,。請客戶使用T25細(xì)胞瓶傳代,,一瓶傳二瓶。
2. 謹(jǐn)記:培養(yǎng)原代細(xì)胞前三天,,需對原代細(xì)胞生長狀態(tài)進(jìn)行拍照并注明和標(biāo)記時(shí)間,。若原代細(xì)胞培養(yǎng)生長存在質(zhì)量問題,需向本公司提供原代細(xì)胞培養(yǎng)生長的照片和書面說明,。請客戶使用原代細(xì)胞第3代以內(nèi),。原代細(xì)胞培養(yǎng)傳代過多,可能造成原代細(xì)胞的質(zhì)量問題,。
細(xì)胞培養(yǎng)
1.顧客收到T25瓶裝的細(xì)胞如果沒長滿,,建議先放培養(yǎng)箱2-4小時(shí)
2.吸去培養(yǎng)液,取部分放入50ml離心管,,放置于培養(yǎng)箱(放2-3天,,觀察是否有污染)
3.加PBS清洗1-2遍,去PBS,。加6ml完Q培養(yǎng)基放培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng),。1-2天換一次液(如果培養(yǎng)液變黃,,必須盡快換液)
細(xì)胞傳代
1.細(xì)胞密度到達(dá)90%,可以進(jìn)行傳代,。
2.吸去培養(yǎng)液,,加PBS清洗1-2遍,去PBS,。加入0.25%胰酉每1.5ml潤洗10秒,,
3.加12ml完 Q培養(yǎng)基,吹打均勻,,即可分到2個(gè)T25培養(yǎng)瓶里,。(原代細(xì)胞1傳2,若顧客使用培養(yǎng)皿或培養(yǎng)孔板,,建議先包被)
細(xì)胞凍存
1.選擇指數(shù)生長期的細(xì)胞,,吸去培養(yǎng)液,加PBS清洗1-2遍,。去PBS,,加入0.25%胰酉每1.5ml潤洗10秒,去胰酉每,。將培養(yǎng)瓶放37度培養(yǎng)箱,,靠殘余胰酉每繼續(xù)消化細(xì)胞直至細(xì)胞變圓,拍打瓶側(cè)使細(xì)胞脫落,。
2.加1-1.5ml成品凍存液(本公司有賣的,,無血清低DMSO,,無需程序凍存),,分裝至2ml凍存管里,放-80度冰箱過夜,。第二天再轉(zhuǎn)至液氮
細(xì)胞復(fù)蘇
1.從液氮罐取凍存管,,凍存管放置37度水浴鍋1min,至凍存液融解。
2.在超凈臺將凍存液吸取至T25培養(yǎng)瓶,,再加入10-15ml完Q培養(yǎng)基
3.第二天換6ml完Q培養(yǎng)液即可