人臍靜脈內(nèi)皮細胞(英文名：Human Umbilical Vein Endothelial Cells,，HUVEC)在進行血管內(nèi)皮細胞實驗時,，通常選用的細胞模型為人 臍靜脈內(nèi)皮細胞(Human umbilical vein endothelial cells，簡稱HUVECs),。在子宮中,，子宮動脈在胎盤的母體部分出的毛細血管,，與胎盤的子體部胎兒毛細血管靠近，在此處母體和胎兒的血液間進行CO2和O2,，代謝產(chǎn)物即代謝廢物和營養(yǎng)物質(zhì)的交換,。臍動脈將胎兒產(chǎn)生的廢物運送至胎盤，臍靜脈將O2和營養(yǎng)物質(zhì)從胎盤運送給胎兒,。

細胞檢測：

實驗室分離的人臍靜脈內(nèi)皮細胞經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。

細胞培養(yǎng)信息：

1）每2-3天換液一次

2）貼壁生長

3）內(nèi)皮細胞樣

4）可傳5代左右

5）培養(yǎng)基：含F(xiàn)BS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等

細胞到貨須知

1. 請客戶收到本公司原代細胞產(chǎn)品后,，立即對物品包裝,、細胞培養(yǎng)瓶等拍照，如有疑問或問題,，須在24小時內(nèi)通知本公司,，提供照片和書面說明?？蛻羰盏椒莾龃嬖毎?，用75%酒精擦拭瓶身，再將原裝的原代細胞瓶放入細胞培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),，1-4小時后再使用,，吸取瓶中培養(yǎng)液，換6ml完Q培養(yǎng)液,。注意觀察細胞情況,，待貼壁率達到90%以上再按傳代說明操作。請客戶使用T25細胞瓶傳代,，一瓶傳二瓶,。

2. 謹記：培養(yǎng)原代細胞前三天，需對原代細胞生長狀態(tài)進行拍照并注明和標(biāo)記時間,。若原代細胞培養(yǎng)生長存在質(zhì)量問題,，需向本公司提供原代細胞培養(yǎng)生長的照片和書面說明。請客戶使用原代細胞第3代以內(nèi)。原代細胞培養(yǎng)傳代過多,，可能造成原代細胞的質(zhì)量問題,。

細胞培養(yǎng)

1.顧客收到T25瓶裝的細胞如果沒長滿，建議先放培養(yǎng)箱2-4小時

2.吸去培養(yǎng)液,，取部分放入50ml離心管,，放置于培養(yǎng)箱（放2-3天，觀察是否有污染）

3.加PBS清洗1-2遍,，去PBS,。加6ml完Q培養(yǎng)基放培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。1-2天換一次液（如果培養(yǎng)液變黃,，必須盡快換液）

細胞傳代

1.細胞密度到達90%,，可以進行傳代。

2.吸去培養(yǎng)液,，加PBS清洗1-2遍,，去PBS。加入0.25%胰酉每1.5ml潤洗10秒,，

3.加12ml完 Q培養(yǎng)基,，吹打均勻，即可分到2個T25培養(yǎng)瓶里,。（原代細胞1傳2，若顧客使用培養(yǎng)皿或培養(yǎng)孔板,，建議先包被）

細胞凍存

1.選擇指數(shù)生長期的細胞,，吸去培養(yǎng)液，加PBS清洗1-2遍,。去PBS,，加入0.25%胰酉每1.5ml潤洗10秒，去胰酉每,。將培養(yǎng)瓶放37度培養(yǎng)箱,，靠殘余胰酉每繼續(xù)消化細胞直至細胞變圓，拍打瓶側(cè)使細胞脫落,。

2.加1-1.5ml成品凍存液（本公司有賣的,，無血清低DMSO，無需程序凍存）,，分裝至2ml凍存管里,，放-80度冰箱過夜。第二天再轉(zhuǎn)至液氮

細胞復(fù)蘇

1.從液氮罐取凍存管,，凍存管放置37度水浴鍋1min,至凍存液融解,。

2.在超凈臺將凍存液吸取至T25培養(yǎng)瓶，再加入10-15ml完Q培養(yǎng)基

3.第二天換6ml完Q培養(yǎng)液即可