THP-1(人單核細胞白血病細胞)系是1980年Tsuchiya等人建立的人單核細胞白血病細胞系,。它來自一位急性單核細胞白血病患者的血液，有分化為多種巨噬細胞的能力,，是各領(lǐng)域研究常用的細胞系之一,。

THP-1（人急性單核細胞白血病細胞）是人外周血的單核細胞系，最初來源于急性單核細胞性白血病患者,。屬于懸浮細胞,，適合用于轉(zhuǎn)染或感染實驗。其表面抗原HLA型為：A2,，A9,，B5，DRw1,，DRw2,。

細胞培養(yǎng)信息：

細胞名稱：THP-1(人單核細胞白血病細胞)

細胞別稱：THP1; THP 1; THPI; THP-1(ATCC); Tohoku Hospital Pediatrics-1

生長特性:  懸浮

培養(yǎng)條件:  RPMI-1640+10% FBS

培養(yǎng)環(huán)境:  空氣，95%,；二氧化碳 (CO2),，5% 

細胞檢測：

實驗室分離的人單核細胞白血病(THP-1)細胞經(jīng)鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。

THP-1細胞培養(yǎng)注意事項

● THP-1細胞懸浮圓形生長,，偶有小聚團,，屬于正常現(xiàn)象,，無需吹散,；

● 圓形透亮、細胞膜完整的細胞是活細胞,，如果無法判斷,，可以取少量細胞用臺盼藍染色后計數(shù)確定細胞活率；

● 少量細胞附著瓶底屬于正?，F(xiàn)象,，可將懸浮細胞轉(zhuǎn)移至新瓶，丟棄貼壁的細胞,；

● THP-1喜歡偏酸環(huán)境,，培養(yǎng)基呈橘色時可不用換液，補充適量新鮮培養(yǎng)基維持一天再進行換液或傳代操作,；

● THP-1有密度依賴性,，密度低時生長較慢，培養(yǎng)密度維持在30萬-100萬細胞/mL之間為宜,，超過80萬細胞/mL即可傳代,；

● THP-1復(fù)蘇后恢復(fù)較慢，如無特殊情況,，復(fù)蘇后48小時內(nèi)不對細胞進行操作,；

● THP-1生長需要穩(wěn)定的環(huán)境，不頻繁拿出培養(yǎng)箱,，不頻繁離心；

● 培養(yǎng)時瓶子豎立放置（瓶蓋朝上）,，可增加細胞局部密度,，促進細胞增殖。

● β-巰基乙醇可以消除活性氧自由基,，維持細胞高密度生長,。若培養(yǎng)基中不添加β-巰基乙醇，長期培養(yǎng)細胞可能會出現(xiàn)大量貼壁，嚴(yán)重聚團等情況,。

細胞到貨須知

1. 請客戶收到本公司原代細胞產(chǎn)品后,，立即對物品包裝、細胞培養(yǎng)瓶等拍照,，如有疑問或問題,，須在24小時內(nèi)通知本公司，提供照片和書面說明,?？蛻羰盏椒莾龃嬖毎螅?5%酒精擦拭瓶身,，再將原裝的原代細胞瓶放入細胞培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),，1-4小時后再使用，吸取瓶中培養(yǎng)液,，換6ml完Q培養(yǎng)液,。注意觀察細胞情況，待貼壁率達到90%以上再按傳代說明操作,。請客戶使用T25細胞瓶傳代,，一瓶傳二瓶。

2. 謹(jǐn)記：培養(yǎng)原代細胞前三天,，需對原代細胞生長狀態(tài)進行拍照并注明和標(biāo)記時間,。若原代細胞培養(yǎng)生長存在質(zhì)量問題，需向本公司提供原代細胞培養(yǎng)生長的照片和書面說明,。請客戶使用原代細胞第3代以內(nèi),。原代細胞培養(yǎng)傳代過多，可能造成原代細胞的質(zhì)量問題,。

細胞培養(yǎng)

1.顧客收到T25瓶裝的細胞如果沒長滿,，建議先放培養(yǎng)箱2-4小時

2.吸去培養(yǎng)液，取部分放入50ml離心管,，放置于培養(yǎng)箱（放2-3天,，觀察是否有污染）

3.加PBS清洗1-2遍，去PBS,。加6ml完Q培養(yǎng)基放培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng),。1-2天換一次液（如果培養(yǎng)液變黃，必須盡快換液）

細胞傳代

1.細胞密度到達90%,，可以進行傳代,。

2.吸去培養(yǎng)液，加PBS清洗1-2遍,，去PBS,。加入0.25%胰酉每1.5ml潤洗10秒,，

3.加12ml完 Q培養(yǎng)基，吹打均勻,，即可分到2個T25培養(yǎng)瓶里,。（原代細胞1傳2，若顧客使用培養(yǎng)皿或培養(yǎng)孔板,，建議先包被）

細胞凍存

1.選擇指數(shù)生長期的細胞,，吸去培養(yǎng)液，加PBS清洗1-2遍,。去PBS,，加入0.25%胰酉每1.5ml潤洗10秒，去胰酉每,。將培養(yǎng)瓶放37度培養(yǎng)箱,，靠殘余胰酉每繼續(xù)消化細胞直至細胞變圓，拍打瓶側(cè)使細胞脫落,。

2.加1-1.5ml成品凍存液（本公司有賣的,，無血清低DMSO，無需程序凍存）,，分裝至2ml凍存管里,，放-80度冰箱過夜。第二天再轉(zhuǎn)至液氮

細胞復(fù)蘇

1.從液氮罐取凍存管,，凍存管放置37度水浴鍋1min,至凍存液融解,。

2.在超凈臺將凍存液吸取至T25培養(yǎng)瓶，再加入10-15ml完Q培養(yǎng)基

3.第二天換6ml完Q培養(yǎng)液即可