NCI-H520 (人肺鱗癌細(xì)胞)是由A.F. Gazdar等在1982年從一名肺鱗狀細(xì)胞癌患者的肺標(biāo)本中提取的,,呈上皮細(xì)胞樣,,為貼壁細(xì)胞。
細(xì)胞培養(yǎng)信息:
細(xì)胞名稱:NCI-H520 (人肺鱗癌細(xì)胞)
細(xì)胞別稱:H520; H-520; NCI-HUT-520; NCIH520
細(xì)胞來源:肺癌
生長特性: 貼壁細(xì)胞、上皮細(xì)胞樣
培養(yǎng)條件: 1640+10%FBS
培養(yǎng)環(huán)境: 空氣,,95%,;二氧化碳 (CO2),5%
細(xì)胞含量:>1×10? 細(xì)胞數(shù)
細(xì)胞規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
細(xì)胞用途:僅供科研使用,。
NCI-H520細(xì)胞培養(yǎng)注意事項:
① 該細(xì)胞呈島狀聚集生長,,控制消化時間尤為重要:消化時間過短時,細(xì)胞不易從瓶(皿)壁脫落,,吹打過度會導(dǎo)致細(xì)胞碎裂增多,,吹散不開的細(xì)胞團塊也會導(dǎo)致細(xì)胞堆積影響生長;消化時間過長也可能導(dǎo)致細(xì)胞傳代后漂浮增多,;建議每隔一分鐘顯微鏡下觀察細(xì)胞消化狀態(tài),,確認(rèn)細(xì)胞與細(xì)胞間明顯分離有間隙時再終止消化,使細(xì)胞盡量分散,,避免聚團,。
② 消化傳代時,吹打細(xì)胞注意盡量輕柔,,不要產(chǎn)生過多氣泡以免造成細(xì)胞碎裂增多,;
③ 該細(xì)胞生長過程中,培養(yǎng)基中始終有少量漂浮的細(xì)胞碎片,,背景中可看到少量黑點,,換液可暫時改善,但繼續(xù)培養(yǎng)仍會出現(xiàn)無法避免,。以上都是常見現(xiàn)象,,不影響細(xì)胞增殖和實驗;
④ 細(xì)胞生長偏慢時,,可以提高5~10%血清濃度(血清總濃度不超過 20%)培養(yǎng)一段時間,,待細(xì)胞狀態(tài)和生長速度恢復(fù)正常后換回正常血清濃度。
⑤ 該細(xì)胞貼壁展開較慢,,復(fù)蘇24 h后,,大部分細(xì)胞呈不規(guī)則多邊形或圓形,細(xì)胞形態(tài)未完Q展開,,48 h后可見細(xì)胞開始成片聚集生長;新復(fù)蘇培養(yǎng)細(xì)胞,,可見較多漂浮,,復(fù)蘇48 h內(nèi)可先不換液,保留漂浮細(xì)胞繼續(xù)貼壁,;
⑥ 該細(xì)胞生長速度中等,,細(xì)胞匯合度達(dá)到80%以上時即可傳代,1:2傳代約2~3天可再次傳代,1:3傳代約3~4天可再次傳代,;
運輸和保存:
1,、1mL凍存管包裝干冰運輸,收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇,,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈,、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,,請立即與我們聯(lián)系,。
2、T25瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨,,收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作,。