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人/鼠雜交骨髓瘤細胞 檢測試劑

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具體成交價以合同協(xié)議為準

產品型號:

品       牌:

廠商性質:生產商

所  在  地:上海市

更新時間:2018-06-12 09:20:27瀏覽次數:254

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人/鼠雜交骨髓瘤細胞

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人/鼠雜交骨髓瘤細胞的產品介紹

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人/鼠雜交骨髓瘤細胞

人/鼠雜交骨髓瘤細胞選購方法

人/鼠雜交骨髓瘤細胞細胞株

  Q1. 人/鼠雜交骨髓瘤細胞液體培養(yǎng)基的保存是冷藏好,?還是冷凍好,?

  要冷藏!,!因為液體培養(yǎng)基經冷凍后再經溶化時,,其溶液的pH值會發(fā)生改變,溶液往往變堿,,某些成分溶解也會受到影響對細胞生長不利,。故液體培養(yǎng)基一定要存放在冷藏箱中,通常液體培養(yǎng)基在冷藏條件下可存放6個月 ~ 一年,。


  Q2.人/鼠雜交骨髓瘤細胞 液體培養(yǎng)基中谷氨酰胺的作用,,及使用方法。

  幾乎所有的細胞對谷氨酰胺有較高的要求,,細胞需要谷氨酰胺合成蛋白質,,在缺少谷氨酰胺時,細胞生長不良而死亡。所以,,各種培養(yǎng)液中都含有較大量的谷氨酰胺,。谷氨酰胺在溶液中很不穩(wěn)定,應置-20 ?C冰凍保存,,用前加入培養(yǎng)基中,。加有谷氨酰胺的液體培養(yǎng)基4 ?C 冰箱儲存兩周以上時,應重新加入原來量的谷氨酰胺,?;A醫(yī)學細胞中心在其服務項目中配制分裝了高濃度(100倍)的谷氨酰胺溶液(1ml/支)。每支1ml的谷氨酰胺加到99ml*培養(yǎng)基中,,其終濃度為2mM/ml培養(yǎng)基,。包裝為粉紅色,-24?C保存,。


  Q3.細胞計數及存活測試
1,、原理:
(1)計算細胞數目可用血球計數盤或是Coultercounter粒子計數器自動計數。
(2)血球計數盤一般有二個chambers,,每個chamber中細刻9個1mm2大正方形,,其中4個角落之正方形再細刻16個小格,深度均為0.1mm,。當chamber上方蓋上蓋玻片后,,每個大正方形之體積為1mm2×0.1mm=1.0x10-4ml。使用時,,計數每個大正方形內之細胞數目,,乘以稀釋倍數,再乘以104,,即為每ml中之細胞數目,。
(3)存活測試之步驟為dyeexclusion,利用染料會滲入死細胞中而呈色,,而活細胞因細胞膜完整,,染料無法滲入而不會呈色。一般使用藍色之trypan blue染料,,如果細胞不易吸收trypan blue,,則用紅色之Erythrosin bluish。計算細胞活率:活細胞數/(活細胞數+死細胞數)×100%,。計數應在臺盼蘭染色后數分鐘內完成,,隨時間延長,部分活細胞也開始攝取染料;因為臺盼蘭對蛋白質有很強的親和力,,用不含血清的稀釋液,,可以使染色計數更為準確。


  Q4.細胞特性
在細胞培養(yǎng)之前,我們要了解一下你所要養(yǎng)細胞的基本特性,,這點可以從細胞的產品說明書或者從ATCC細胞庫查詢,。除此之外我們還要知道每管細胞的數量,建議分裂或傳代的比例,,和已知細胞的傳代代次等信息,。


  Q5.準備培養(yǎng)基
復蘇細胞時需要準備合適的培養(yǎng)基,血清和細胞生長所需的添加劑,。大部分培養(yǎng)細胞所用的培養(yǎng)體系,,可以在訂購細胞系時獲得。
雖然大多數細胞系可以在不止一種培養(yǎng)基中生長,,但是當培養(yǎng)基改變時,,細胞的性質也會變化。因此,,使用細胞庫推薦的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞會獲得的效果,。


  Q6.開啟凍存管
1.準備一個培養(yǎng)瓶,加入適宜細胞培養(yǎng)的培養(yǎng)基,,液體體積按照說明書的推薦配置,并平衡培養(yǎng)基的溫度和pH(CO2),?!?br />2.在37℃水浴中或細胞的正常生長溫度下將凍存管輕輕搖動。解凍要快,,約2分鐘或直到冰晶融化即可,。
3.從水浴中取出凍存管并用浸泡或噴灑70%乙醇的方式來消毒。進一步的操作均需在無菌操作臺中嚴格無菌條件下進行,。
4.擰開凍存管的管帽并將內容物轉移到一個含有9 ml推薦培養(yǎng)基的無菌離心管中,。通過溫和離心(125×g 10 min)除去冷凍保護劑(DMSO)。棄去上清,,并用1或2 ml*培養(yǎng)基重懸細胞,。將這些細胞懸液轉移到含有*培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中并輕輕搖動以*混勻。
5.培養(yǎng)24小時后檢查細胞狀態(tài)并在需要時進行傳代,。


  Q7. 人/鼠雜交骨髓瘤細胞 培養(yǎng)用液pH對細胞生長的影響

  由于,,大多數細胞適宜pH為7.2~7.4,偏離此范圍對細胞將產生有害的影響,。各種細胞對pH的要求也不*相同,,原代培養(yǎng)細胞一般對pH變動耐受差,無限細胞系耐受力強,。


  但總體來說,,細胞耐酸性比耐堿性強一些,偏酸環(huán)境中更利于細胞生長。因此,,我們在配制培養(yǎng)用液時,,可把液體的pH稍微調得偏酸一些。液體在經過0.10um或0.22um濾膜過濾時,,溶液的pH還會向上浮動0.2左右,。


人/鼠雜交骨髓瘤細胞

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