本公司提供人皮膚成纖維細(xì)胞產(chǎn)品訂購(gòu)。上海乾思生化試劑網(wǎng)主營(yíng)ATCC細(xì)胞,、ATCC細(xì)胞株,、ATCC細(xì)胞系,凍存復(fù)蘇細(xì)胞皆有,所供細(xì)胞成活率高,。如果您需要訂購(gòu)細(xì)胞產(chǎn)品,,請(qǐng)與我們,我們將在12小時(shí)內(nèi)給您回復(fù),。
冷凍細(xì)胞操作步驟:
1.收集對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞,;
2.以25μl臺(tái)盼藍(lán)溶液稀釋25μl細(xì)胞懸液,;用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)并計(jì)算細(xì)胞存活率(至少應(yīng)該在90%以上);
3.細(xì)胞懸液在4℃ 條件下200磄離心10分鐘,;
4.將沉淀的細(xì)胞重新懸浮在冷凍液中(大約5?06細(xì)胞/0.5 ml 冷凍液),;
5.將細(xì)胞懸液加入到冷凍管中,每管0.5 ml,;
6.將冷凍管置于-80℃冰箱中,;
7.24小時(shí)后,將冷凍管移入液氮罐中,;
8.在記錄本或電腦中記錄下每一個(gè)冷凍管的位置以確保在以后應(yīng)用時(shí)能夠找到每一個(gè)冷凍管,。
培養(yǎng)條件:
*培養(yǎng)基:DMEM高糖培養(yǎng)基90%;胎牛血清10%,。
培養(yǎng)條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
傳代方法:
收到細(xì)胞后,,取出培養(yǎng)瓶在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況。 (一)如果細(xì)胞未長(zhǎng)滿,,用75%酒精噴灑整 個(gè)瓶消毒后放到超菌 臺(tái)內(nèi),,嚴(yán)格無(wú)菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶,,吸出培養(yǎng)液,,僅留下 10ml培養(yǎng)液在瓶?jī)?nèi)繼 續(xù)培養(yǎng)。
(二)如果細(xì)胞已長(zhǎng)滿,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。