THP-1(人急性單核細(xì)胞白血病細(xì)胞)系是1980年Tsuchiya等人建立的人單核細(xì)胞白血病細(xì)胞系,。它來自一位急性單核細(xì)胞白血病患者的血液,,有分化為多種巨噬細(xì)胞的能力,是各領(lǐng)域研究常用的細(xì)胞系之一,。
THP-1(人單核細(xì)胞白血病細(xì)胞)是人外周血的單核細(xì)胞系,,最初來源于急性單核細(xì)胞性白血病患者。屬于懸浮細(xì)胞,,適合用于轉(zhuǎn)染或感染實(shí)驗(yàn),。其表面抗原HLA型為:A2,A9,,B5,,DRw1,DRw2,。
細(xì)胞培養(yǎng)信息:
細(xì)胞名稱:THP-1(人急性單核細(xì)胞白血病細(xì)胞)
細(xì)胞別稱:THP1; THP 1; THPI; THP-1(ATCC); Tohoku Hospital Pediatrics-1
生長特性: 懸浮
培養(yǎng)條件: RPMI-1640+10% FBS
培養(yǎng)環(huán)境: 空氣,,95%;二氧化碳 (CO2),,5%
細(xì)胞檢測:
實(shí)驗(yàn)室分離的人單核細(xì)胞白血病(THP-1)細(xì)胞經(jīng)鑒定,,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。
THP-1細(xì)胞培養(yǎng)注意事項(xiàng)
● THP-1細(xì)胞懸浮圓形生長,偶有小聚團(tuán),,屬于正?,F(xiàn)象,無需吹散,;
● 圓形透亮,、細(xì)胞膜完整的細(xì)胞是活細(xì)胞,如果無法判斷,,可以取少量細(xì)胞用臺(tái)盼藍(lán)染色后計(jì)數(shù)確定細(xì)胞活率,;
● 少量細(xì)胞附著瓶底屬于正常現(xiàn)象,,可將懸浮細(xì)胞轉(zhuǎn)移至新瓶,,丟棄貼壁的細(xì)胞;
● THP-1喜歡偏酸環(huán)境,,培養(yǎng)基呈橘色時(shí)可不用換液,,補(bǔ)充適量新鮮培養(yǎng)基維持一天再進(jìn)行換液或傳代操作;
● THP-1有密度依賴性,,密度低時(shí)生長較慢,,培養(yǎng)密度維持在30萬-100萬細(xì)胞/mL之間為宜,超過80萬細(xì)胞/mL即可傳代,;
● THP-1復(fù)蘇后恢復(fù)較慢,,如無特殊情況,復(fù)蘇后48小時(shí)內(nèi)不對(duì)細(xì)胞進(jìn)行操作,;
● THP-1生長需要穩(wěn)定的環(huán)境,,不頻繁拿出培養(yǎng)箱,不頻繁離心,;
● 培養(yǎng)時(shí)瓶子豎立放置(瓶蓋朝上),,可增加細(xì)胞局部密度,促進(jìn)細(xì)胞增殖,。
● β-巰基乙醇可以消除活性氧自由基,,維持細(xì)胞高密度生長。若培養(yǎng)基中不添加β-巰基乙醇,,長期培養(yǎng)細(xì)胞可能會(huì)出現(xiàn)大量貼壁,,嚴(yán)重聚團(tuán)等情況。