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技術(shù)點心：減少超濾濃縮發(fā)生蛋白沉淀
蛋白相較于核酸,，因其承擔生物學(xué)功能,，有“活性”特征,，蛋白樣品的處理要求操作者有更好的經(jīng)驗和技巧,。拿蛋白濃縮這一常規(guī)操作來講,，根據(jù)樣品規(guī)模（體積）,、通量（樣品個數(shù)）、混合物的復(fù)雜程度及相關(guān)設(shè)備配套要求,，就分為鹽析,、透析、凍干,、分子篩色譜等等不同選擇,。而超濾，不論從操作的簡便性還是處理效率來說,，都算優(yōu)勢突出,，成為蛋白濃縮/除鹽/緩沖液置換等蛋白綜合處理的。掌握好超濾技巧,，我們就能更好地保全蛋白活性和得率,。針對于蛋白在超濾濃縮過程中容易發(fā)生沉淀這個現(xiàn)象，就超濾管的使用提出一些建議,，供您靈活選用,。
蛋白如果濃縮過快或者過度濃縮都有可能引起蛋白沉淀。我們建議蛋白濃縮后的zui終濃度不超過20mg/ml,。對于對濃縮速度敏感而容易沉淀的蛋白,，我們建議的改進方法是：
1）離心力降為推薦離心力的30%-50%；
2）改選擇截留分子量更大的過濾裝置（如原本選用10k,，此時可以選擇30k）,；
3）在濃縮過程中取出超濾管,，用槍頭反復(fù)吹吸幾次。