聯(lián)系電話
上海寶葉生物科技有限公司
中級會員·6年
- 聯(lián)系人：
- 蔣先生
- 電話：
- 手機：
- 13391038817
- 地址：
- 上海市嘉定區(qū)新源路155弄
- 個性化：
- www.shjsbio.com
- 網(wǎng)址：
- www.shjsbio.com
掃一掃訪問手機商鋪
瘧疾（malaria）是瘧原蟲經(jīng)按蚊叮咬傳播的傳染病,，臨床上以間歇性寒戰(zhàn),、高熱、大汗和脾大,、貧血等為特征,，惡性瘧疾能引起兇險發(fā)作。常見檢測方法為間接熒光抗體染色法檢測瘧原蟲抗體,。
[檢測方法]
[方法學(xué)原理] 抗原片上加患者血清,，若血清中含有瘧原蟲抗體,，即可與抗原結(jié)合成相應(yīng)的抗原抗體復(fù)合物，此復(fù)合物再與熒光標(biāo)記抗人IgG抗體結(jié)合,，zui后通過熒光顯微鏡觀察熒光反應(yīng),。
[試劑]
1．0．01mol／LpH7．6 PBS
2．熒光標(biāo)記抗人IgG抗體
3．陰性對照、陽性對照血清
4．抗原片
[檢測步驟]
1．用鉛筆將抗原片（厚血膜）劃成12個小格,，放置蒸餾水中浸泡2～3min,，以脫去血紅蛋白，吹干,。
2．用無水乙醇固定10min，吹干,。
3．將被檢血清用PBS從1：10開始作倍比稀釋,，將此稀釋血清分別加在小格中，每格1小滴,，同時設(shè)陽性對照和陰性對照,。
4．將抗原片放濕盒中置37C環(huán)境中孵育30min，棄去殘余血清,，用PBS洗3次,，每次3min，用蒸餾水漂洗一遍以脫鹽,，吹干,。
5．將已稀釋的熒光標(biāo)記抗人IgG抗體加于各小格中心，每格1小滴,，同上孵育,，漂洗吹干，熒光顯微鏡檢,。
[結(jié)果判斷] 陽性結(jié)果小格內(nèi)有與原蟲胞漿結(jié)構(gòu)相似的明亮熒光,；陰性結(jié)果原蟲胞漿結(jié)構(gòu)模糊無熒光。陰陽性對照結(jié)果無誤,，實驗成立,。
[正常參考值] 正常人抗體效價≤1：10，但瘧疾流行區(qū)的正常人（成人）抗體效價稍高,。
[注意事項]
1．具有較多裂殖體的血片,，陽性檢出率高，因為瘧原蟲的裂殖體的抗原性zui強,。
2．采用厚血膜做抗原片時,，經(jīng)溶血后瘧原蟲容易變形，故觀察結(jié)果時要認(rèn)真辨認(rèn)（必要時可做瑞氏染色對照）以排除非特異性熒光,。
3．加被檢血清時,，要防止互相串格,。
[臨床意義] 被檢血清≥1：20陽性，表明瘧原蟲感染,。流行區(qū)人們抗體陽性檢出率較高,。有學(xué)者報道患者抗體陽性率為55．1％，明顯高于血膜染色檢查法（陽性率28．1％）,。間日瘧患者經(jīng)*后熒光抗體的陽性率迅速下降,。值得注意的是，已*10余年的人群中尚有8％的人存在低滴度抗體水平,。由此可見,，本試驗結(jié)果陽性的意義不在于診斷，而在于流行病學(xué)調(diào)查,。
