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用于染色培養(yǎng)細(xì)胞標(biāo)本的制備

2012-9-20  閱讀(1630)

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用于染色的培養(yǎng)細(xì)胞既可以是貼壁細(xì)胞,也可以是懸浮細(xì)胞,。貼壁細(xì)胞通常使其生長在合適的固相支持物上,;懸浮細(xì)胞可以直接固定,也可以通過甩片或使用化學(xué)黏合劑黏附在固相支持物上,。

 
(一)貼壁細(xì)胞
 
    貼壁細(xì)胞的準(zhǔn)備比較簡單,,可以使其生長于適當(dāng)?shù)妮d玻片、蓋玻片或塑料組織培養(yǎng)皿中。如果實驗要求高分辨率或需拍照,,細(xì)胞應(yīng)生長于載玻片或蓋玻片上,;如果實驗的分辨率要求不高,或者是大量樣品的篩選,,可使細(xì)胞生長于塑料組織培養(yǎng)皿中,。
 
    將貼壁細(xì)胞生長在固相支持物上有其*的優(yōu)點,操作步驟,,如沖洗,、固定、通透及染色均較簡單易行,,便于同時進(jìn)行大量不同種類細(xì)胞,、不同抗體及不同條件下的操作。
 
(二)懸浮細(xì)胞
 
    懸浮細(xì)胞的制備可以采用多種不同的方法,。如果是進(jìn)行細(xì)胞內(nèi)部抗原的定位,,一般可用甩片機(jī)將細(xì)胞甩在一張載玻片上,也可以先用帶電的交聯(lián)劑涂在蓋玻片上,,然后再將細(xì)胞黏附于蓋玻片上,。此后的操作步驟與貼壁細(xì)胞相同。
 
    在某些情況下,,細(xì)胞可在懸浮狀態(tài)下染色,。這是因為在其后的操作步驟中,需要細(xì)胞在懸浮狀態(tài)下進(jìn)行,,例如細(xì)胞分選,。在懸浮狀態(tài)下處理細(xì)胞更加繁瑣,因為每一洗滌步驟均須離心,、再懸浮細(xì)胞,。

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