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用于染色培養(yǎng)細胞標本的制備

2012-9-20  閱讀(1626)

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用于染色的培養(yǎng)細胞既可以是貼壁細胞,也可以是懸浮細胞,。貼壁細胞通常使其生長在合適的固相支持物上,;懸浮細胞可以直接固定,也可以通過甩片或使用化學(xué)黏合劑黏附在固相支持物上,。

 
(一)貼壁細胞
 
    貼壁細胞的準備比較簡單,,可以使其生長于適當?shù)妮d玻片、蓋玻片或塑料組織培養(yǎng)皿中,。如果實驗要求高分辨率或需拍照,,細胞應(yīng)生長于載玻片或蓋玻片上;如果實驗的分辨率要求不高,,或者是大量樣品的篩選,,可使細胞生長于塑料組織培養(yǎng)皿中。
 
    將貼壁細胞生長在固相支持物上有其*的優(yōu)點,,操作步驟,,如沖洗、固定,、通透及染色均較簡單易行,,便于同時進行大量不同種類細胞、不同抗體及不同條件下的操作,。
 
(二)懸浮細胞
 
    懸浮細胞的制備可以采用多種不同的方法,。如果是進行細胞內(nèi)部抗原的定位,一般可用甩片機將細胞甩在一張載玻片上,,也可以先用帶電的交聯(lián)劑涂在蓋玻片上,,然后再將細胞黏附于蓋玻片上。此后的操作步驟與貼壁細胞相同,。
 
    在某些情況下,,細胞可在懸浮狀態(tài)下染色。這是因為在其后的操作步驟中,需要細胞在懸浮狀態(tài)下進行,,例如細胞分選,。在懸浮狀態(tài)下處理細胞更加繁瑣,因為每一洗滌步驟均須離心,、再懸浮細胞,。

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