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冰凍切片包埋劑及使用方法

2012-7-3  閱讀(3028)

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冰凍切片包埋劑及使用方法

OCT 冰凍切片包埋劑是一種聚乙二醇和聚乙烯醇的水溶性混合物,,目前已廣泛用于免疫組化實驗室中,,

其用途是在冰凍切片時支撐組織,,以增加組織的連續(xù)性,,減少皺折及碎裂,。又因OCT 混合物為水溶性,,故

在漂片時可溶于水,所以在以后的染色中不會增加背景染色,。

利用OCT 混合物(opti-mum cutting temperature compound)預(yù)先浸潤組織,,然后再進行恒冷箱切片,,

使切片質(zhì)量得到改善。

目前實驗室使用的冰凍切片包埋劑主流產(chǎn)品是日本櫻花公司的O.C.T. Compound ,,貨號:4583,,118ml/

瓶,質(zhì)量穩(wěn)定,,研究者比較熟習,。

在使用OCT 進行包埋時,對于包埋模具而言,,您可以選擇廠家已有的產(chǎn)品,,也可以根據(jù)實際條件利用手

邊已有的包埋管、包埋板等,;也有心靈手巧的研究者自己利用銅版紙折疊出很漂亮實用的OCT 包埋模具(當

然前提是您的用量要少),。

OCT 包埋劑(SAKURA 產(chǎn)品)包埋流程:

1. 將放在蔗糖溶液中的組織塊取出,放入20g L-1 蔗糖與OCT 包埋劑1體積比例混合液中,,室溫浸

2h

2. 移入OCT 包埋劑中室溫浸泡4h,,更換新的OCT 包埋劑,室溫浸泡6h.

3. 將標本置于托物臺,,用恒冷箱切片機切片(一般-22℃),,片厚10μm,貼于預(yù)處理的載玻片上,,-20

冰箱保存,。

在實際工作中,有研究者發(fā)現(xiàn)當包埋的樣本體積較大或者冰凍溫度要求更低一點時,,使用櫻花的Oct(貨

號:4583)進行包埋往往很難取得理想的包埋結(jié)果,。當您遇到這樣的麻煩時,我們建議您采用另外一種Oc

包埋劑Tissue Freezing Medium,,美國TBS 公司生產(chǎn)(貨號:72592),。

如果該文對您的學習和研究能有絲毫幫助,我們都會備感欣慰

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