你知道核酸提取儀應(yīng)該怎么選購嗎
閱讀:748 發(fā)布時間:2023-1-10
核酸提取儀,是應(yīng)用配套的核酸提取試劑來自動完成樣本核酸的提取工作的儀器,,核酸提取儀分為兩類:一類是大型的自動化的,一般稱為自動液體工作站;另一類是小型自動核酸提取儀,,利用封裝好的配套試劑自動完成提取純化過程,。
目前市場上面的核酸提取儀的種類比較多,如何選擇到自己心儀的儀器需要你在市場上面進(jìn)行一些比較:
1. 根據(jù)儀器型號大小不同劃分
1) 自動液體工作站
自動液體工作站是功能非常強大的設(shè)備,,液體分液,、吸液等自動完成,甚至能通過整合擴增,、檢測等功能,,實現(xiàn)標(biāo)本提取,、擴增、檢測全自動化,。提取核酸只是其功能的一個應(yīng)用,,不太適合常規(guī)實驗室提取核酸,一般都應(yīng)用在單一類標(biāo)本并且一次提取標(biāo)本量非常大(至少96個,,一般幾百個)的實驗需求上,。自動工作站的平臺建立及平臺的運作,需要比較大的資金,。
2) 小型自動核酸提取儀
小型的自動化儀器是通過運行結(jié)構(gòu)的特殊性來達(dá)到自動提取核酸的目的,,可以在任何實驗室得到應(yīng)用。
2. 根據(jù)提取原理不同劃分
1) 采用離心柱法的儀器
離心柱法核酸提取儀主要采用離心機和自動移液裝置相結(jié)合的方法,,通量一般在1-12個樣本,,操作時間和手工提取差不多,并不能提高實際工作效率,,且價格昂貴,,不同型號儀器的耗材也不能通用,僅適合經(jīng)費充足的大型實驗室使用,。
2) 采用磁珠法的儀器
以磁珠為載體,,利用磁珠在高鹽低PH值下吸附核酸,在低鹽高PH值下與核酸分離的原理,,再通過移動磁珠或轉(zhuǎn)移液體來實現(xiàn)核酸的整個提取純化過程,。所以可設(shè)計成很多種通量,既可以單管提取,,也可以提取8-96個樣本,,且其操作簡單快捷,,提取96個樣本僅需30-45min,,大大提高了實驗效率,且成本低廉,,因而可以在不同實驗室使用,,是目前市場上的主流儀器。
磁珠法自動核酸提取儀又分為磁棒法和抽吸法
先說抽吸法:顧名思義,,抽吸法就是通過自動移液裝置來進(jìn)行,,通過自動移液裝置來加入裂解液、磁珠吸附,;抽走裂解液,,加入漂洗液,磁珠吸附,,抽走漂洗液,,加入洗脫緩沖液,。從步驟上好像沒什么問題,但是抽吸法最大的問題在于,,為了在去除廢液的時候不抽走磁珠,,移液器不能靠磁珠太近,以防磁珠連同廢液被抽掉,,這樣每一次抽廢液的時候總有一小部分不能全部的抽走,,特別是磁鐵在底部的裝置,因為磁珠被磁鐵吸附在底部,,所以移液器不能靠底部太近,,這樣漂洗液就不能全部去除,殘留的漂洗液中的鹽和乙醇會影響后面的洗脫效率和PCR成功率,;磁鐵在側(cè)面的裝置殘留的液體會少些,,但是洗脫的效率也不好,依靠DNA自行溶解到洗脫緩沖液中,,除非等上半小時以上,,所以有些96自動核酸提取工作站,提取一輪的時間需要150分鐘,,32磁棒法的同樣的時間可以提5輪了,。
再說磁棒法核酸提取儀:通量通常有8、16,、32,、96通道,相對于抽吸法,,磁棒法的優(yōu)點是每一步的液體不殘留,,因為磁棒只帶走磁珠,轉(zhuǎn)移到下一個步驟相應(yīng)的反應(yīng)孔中,,另外選擇磁棒法的提取儀器最好要功能更齊全的,,比如可以加熱,每個加熱槽最好獨立溫控,,這樣可以設(shè)置加熱,、裂解、洗脫的不同溫度,,另外很重要的一點是,,帶動磁棒的電機要能帶動磁棒進(jìn)行液體的快速混勻和攪拌,這樣才有利于自動化和有助于裂解和漂洗干凈,。磁棒法的通量選擇最好是32通道,,96通道的看似通量更高,但是有個很現(xiàn)實的問題,96個磁力棒在從一個板轉(zhuǎn)移至另外一個板的時候,,磁力棒上面的液體中途滴下來怎么辦,,它會滴到別的孔中造成污染,而32通道的磁力棒運行軌跡不經(jīng)過其他樣本的上空,,這樣不會交叉污染,。