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超微量分光光度計進行核酸定量的應用分析
閱讀：818 發(fā)布時間：2022-8-10
核酸的定量是超微量分光光度計使用頻率較高的功能,?？梢远咳苡诰彌_液的寡核苷酸,，單鏈DNA,、雙鏈DNA,，以及RNA,。核酸的高吸收峰的吸收波長260nm,。
由于每種核酸的分子構成不一，因此其換算系數(shù)不同,。定量不同類型的核酸,，事先要選擇對應消光因子。如：1OD的吸光值分別相當于50μg/ml的dsDNA,，37μg/ml的ssDNA,，40μg/ml的RNA，30μg/ml的Olig,。
測試后的吸光值經(jīng)過上述系數(shù)的換算,，從而得出相應的樣品濃度。除了核酸濃度,，分光光度計顯示幾個非常重要的比值表示樣品的純度,，如A260/A280的比值，用于評估樣品的純度,，因為蛋白的吸收峰是280nm,。
純凈的樣品，比值大于1.8(DNA)或者2.0(RNA),。如果比值低于1.8或者2.0,，表示存在蛋白質或者酚類物質的影響。
A230表示樣品中存在一些污染物,，如碳水化合物,，多肽，苯酚等,，較純凈的核酸A260/A230的比值大于2.0,。
超微量分光光度計可以像普通的紫外-可見分光光度計一樣行使功能。如BIO-DLMicroDrop可以顯示從185到910nm的光波下樣品的吸光值,?？梢酝瑫r指定檢測40個波長下的吸光值并把數(shù)據(jù)顯示在報告中。