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超微量分光光度計(jì)進(jìn)行核酸定量的應(yīng)用分析
閱讀：734 發(fā)布時(shí)間：2022-8-10
核酸的定量是超微量分光光度計(jì)使用頻率較高的功能。可以定量溶于緩沖液的寡核苷酸,，單鏈DNA,、雙鏈DNA,，以及RNA。核酸的高吸收峰的吸收波長(zhǎng)260nm,。
由于每種核酸的分子構(gòu)成不一,，因此其換算系數(shù)不同。定量不同類型的核酸,，事先要選擇對(duì)應(yīng)消光因子。如：1OD的吸光值分別相當(dāng)于50μg/ml的dsDNA,，37μg/ml的ssDNA,，40μg/ml的RNA，30μg/ml的Olig,。
測(cè)試后的吸光值經(jīng)過(guò)上述系數(shù)的換算,，從而得出相應(yīng)的樣品濃度。除了核酸濃度,，分光光度計(jì)顯示幾個(gè)非常重要的比值表示樣品的純度,，如A260/A280的比值，用于評(píng)估樣品的純度,，因?yàn)榈鞍椎奈辗迨?80nm,。
純凈的樣品，比值大于1.8(DNA)或者2.0(RNA),。如果比值低于1.8或者2.0,，表示存在蛋白質(zhì)或者酚類物質(zhì)的影響。
A230表示樣品中存在一些污染物,，如碳水化合物,，多肽，苯酚等,，較純凈的核酸A260/A230的比值大于2.0,。
超微量分光光度計(jì)可以像普通的紫外-可見分光光度計(jì)一樣行使功能。如BIO-DLMicroDrop可以顯示從185到910nm的光波下樣品的吸光值,?？梢酝瑫r(shí)指定檢測(cè)40個(gè)波長(zhǎng)下的吸光值并把數(shù)據(jù)顯示在報(bào)告中。