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PCR儀的分類及各自的介紹
PCR儀也叫基因擴增儀,，它是利用PCR技術對特定基因做試管內的大量合成,，也就是利用DNA聚合酶進行專一性的連鎖復制,。基因擴增儀一般分為四種：普通基礎PCR儀,，梯度PCR儀,，實時熒光定量PCR儀，原位PCR儀,。
（1）普通基礎PCR儀
一次PCR擴增只能運行一個特定退火溫度的PCR儀,，叫做普通基礎PCR儀。普通基礎PCR儀由主機,，加熱模塊,，PCR管，熱蓋,，控制軟件組成,。
基礎PCR儀主要適用于分子生物學、醫(yī)學臨床診斷,、食品工業(yè),、司法科學、生物技術,、環(huán)境科學,、微生物學、遺傳學,、基因芯片,、基因檢測、基因克隆,、基因表達等領域以聚合酶鏈式反應（Picymerase Chain Reaction , PCR）為特征的,、以檢測DNA/RNA為目的的各種及基因分析。
（2）梯度PCR儀
在一次性PCR擴增中可以設置一系列不同的退火溫度條件（溫度梯度）,，通常12種溫度梯度,，這樣的儀器就叫梯度PCR儀。因為被擴增的不同DNA片段,，其適退火溫度不同,，通過設置一系列的梯度退火溫度進行擴增，從而一次性PCR擴增,，就可以篩選出擴增量高的適退火溫度,，進行有效的擴增。主要用于研究未知DNA退火溫度的擴增,，這樣節(jié)約成本的同時也節(jié)約了時間,。
梯度PCR儀，在不設置梯度的情況下也可以做普通PCR擴增。和普通基礎PCR儀一樣,，梯度PCR儀可用于醫(yī)學,，食品，司法,，科研,，教學等領域。
（3）實時熒光定量PCR儀
在PCR反應體系中加入熒光基因,，利用熒光信號累積實時監(jiān)測整個PCR進程,，后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法，叫做實時熒光定量PCR技術,，也稱real-time Q-PCR,。
其PCR擴增原理和普通PCR儀擴增原理相同，只是PCR擴增時加入的引物是利用同位素,、熒光素等進行標記,，使用引物和熒光探針同時與模板特異性結合擴增。擴增的結果通過熒光信號采集系統(tǒng)實時采集信號連接輸送到計算機分析處理系統(tǒng)得出量化的實時結果輸出,。
熒光定量PCR儀是在普通PCR儀的基礎上增加一個熒光信號采集系統(tǒng)和計算機分析處理系統(tǒng),，與普通PCR儀，梯度PCR儀相比,，無需做電泳分析，實驗一步檢測完成,。熒光檢測系統(tǒng)主要包括激發(fā)光源和檢測器,。激發(fā)光源有鹵鎢燈光源、氬離子激光器,、發(fā)光二極管LED光源,，前者可配多色濾光鏡實現(xiàn)不同激發(fā)波長，而單色發(fā)光二極管LED價格低,、能耗少,、壽命長，不過因為是單色,，需要不同的LED才能更好地實現(xiàn)不同激發(fā)波長,。監(jiān)測系統(tǒng)有超低溫CCD成像系統(tǒng)和PMT光電倍增管，前者可以一次對多點成像,，后者靈敏度高但一次只能掃描一個樣品,，需要通過逐個掃描實現(xiàn)多樣品檢測，對于大量樣品來說需要較長的時間,。
熒光定量PCR儀有單通道,，雙通道，和多通道。當只用一種熒光探針標記的時候,，選用單通道,，有多熒光標記的時候用多通道。單通道也可以檢測多熒光的標記的目的基因表達產物,，因為一次只能檢測一種目的基因的擴增量,，需多次擴增才能檢測完不同的目的基因片段的量。
（4）原位PCR儀
原位PCR儀是在組織細胞里進行PCR反應的一種基因擴增儀,。它結合了具有細胞定位能力的原位雜交和高度特異敏感的PCR技術的優(yōu)點,，可以對細胞或組織內的DNA片段進行原位擴增分析—即定位分析。原位PCR儀由主機,，加熱模塊,，玻片，熱蓋,，控制軟件組成,。
普通的PCR雖然能擴增包括福爾馬林固定、石蠟包埋組織的各種標本的DNA,，但擴增的DNA或RNA產物不能在組織細胞中定位,，因而不能直接與特定的組織細胞特征相，這是該技術一個局限性,。原位雜交雖具有良好的定位能力,，但由于其敏感性問題，尤其是在石蠟切片中,，尚不能檢測出低含量的DNA或RNA序列,。而原位PCR可使擴增的特定DNA片段在分離細胞和組織切片中定位，從而彌補了PCR和原位雜交的不足,。
原位PCR反應是在載玻片的平面上進行,，保持水平可以使反應各組分均勻地分布在組織切片上，所以須在原位PCR儀上進行,，該儀器不但可以使載玻片保持水平,，而且還可以給載玻片進行均勻地加熱，保證擴增反應的順利進行,。
原位PCR儀是細胞學科研與臨床診斷領域里的一項有較大潛力的新技術,，目前應用還不太廣泛。原位PCR既能分辨鑒定帶有靶序列的細胞,，又能標出靶序列在細胞內的位置,，于分子和細胞水平上研究疾病的發(fā)病機理和臨床過程及病理的轉變有重大的實用價值。