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ITC等溫滴定量熱儀的主要用途

閱讀:860      發(fā)布時間:2019-3-18
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  等溫滴定量熱法(Isothermal Titration Calorimetry, ITC)是近年來發(fā)展起來的一種研究生物熱力學與生物動力學的重要方法,,它通過高靈敏度、高自動化的微量量熱儀連續(xù),、準確地監(jiān)測和記錄一個變化過程的量熱曲線,,原位、在線和無損傷地同時提供熱力學和動力學信息,。
  微量熱法具有許多*之處,。它對被研究體系的溶劑性質、光譜性質和電學性質等沒有任何限制條件,,即具有非特異性的*優(yōu)勢,,樣品用量小,,方法靈敏度和度高(本儀器小可檢測熱功率2 nW,小可檢測熱效應0.125uJ,,生物樣品小用量0.4ug,,溫度范圍2 ℃ - 80 ℃,滴定池體積(1.43 ml),。實驗時間較短(典型的ITC實驗只需30-60分鐘,,并加上幾分鐘的響應時間),操作簡單(整個實驗由計算機控制,,使用者只需輸入實驗的參數(shù),,如溫度、注射次數(shù),、注射量等,,計算機就可以完成整個實驗,再由Origin軟件分析ITC得到的數(shù)據(jù)),。測量時不需要制成透明清澈的溶液, 而且量熱實驗完畢的樣品未遭破壞,,還可以進行后續(xù)生化分析。盡管微量熱法缺乏特異性但由于生物體系本身具有特異性,,因此這種非特異性方法有時可以得到用特異方法得不到的結果,,這有助于發(fā)現(xiàn)新現(xiàn)象和新規(guī)律,特別適應于研究生物體系中的各種特異過程,。
  獲得生物分子相互作用的完整熱力學參數(shù),,包括結合常數(shù)、結合位點數(shù),、摩爾結合焓,、摩爾結合熵、摩爾恒壓熱容,,和動力學參數(shù)(如酶活力,、酶促反應米氏常數(shù)和酶轉換數(shù))。

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