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小鼠抗小核糖核蛋白/Sm抗體(snRNP/Sm)ELISA試劑盒

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產(chǎn)品型號48T/96T

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所在地上海市

更新時間:2016-09-25 23:17:02瀏覽次數(shù):510次

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中文名稱:小鼠抗小核糖核蛋白/Sm抗體(snRNP/Sm)ELISA試劑盒

英文簡稱:Mouse small nuclear ribonucleoprotein,snRNP/Sm ELISAKit

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ELISA實驗條件:加樣,包被物質及其濃度
 加樣:在ELISA中除包被外,,一般需要進行4-5次加樣.在定性測定中有時不強調加樣量的準確性,,例如規(guī)定為加樣一滴,此時應該使用相同口徑的滴管,,保持準確的加液姿勢,,使每滴液體的體積基本相同.在定量測定中加樣量力求準確.標本和結合物的稀釋液應按規(guī)定配制.加樣時應將液體加在孔底,避免加在孔壁上部,,并注意不可出現(xiàn)氣泡.
 包被物質及其濃度:在ELISA中,,將抗原或抗體固定在載體表面,稱為固想的包被或包埋,,固想包被的質量直接關系到酶免疫測定法的測定結果.理想的包被應該是:固相表面應該吸附盡可能多的特異抗體(或純抗原物質),;吸附應較牢固,能耐受數(shù)次洗滌,;非特異性吸附作用要?。唧w操作中應考慮下述因素:包被物質及包被濃度,包被緩沖液的pH及離子強度,,包被溫度,,時間及洗滌等.
 抗原或抗體吸附于固相,吸附能力有差異.固相包被的機制有三種:*種是物理性吸附,,即抗原或抗體通過物理力被動地吸附于疏水性固相載體的表面,,物理性吸附的過程較簡單,不發(fā)生化學反應,,不需特殊條件,,適用于多種類型和型式的載體,如聚苯乙烯試管及酶標板凹孔,,纖維素膜等,,目前使用zui廣泛,; 第二種是共價交聯(lián),先讓物理惰性物質(固相)接上化學性質活潑的基團,,通過該基團再把抗原或抗體與固相載體交聯(lián),,引入的活性基團常 為戊二醛.濾紙亦可作為固相,,先用溴化氰激活紙質纖維素,,再與抗體交聯(lián),用化學交聯(lián)法制得的固相,,其吸收容量大,,批號之間的差異小,而且價格低廉,,用共價法交聯(lián)可能是固相包被標準化的*途徑,; 第三種是交聯(lián)于蛋白質,應用極少.
 固相抗體與固相表面的吸附是通過物理作用.糖蛋白類物質如癌胚抗原,,血型物質,,脂蛋白,細菌脂多糖,,糖脂及變性DNA,,均可吸附于聚苯乙烯塑料表面,而天然DNA,,中性多糖用于包被塑料固相表面的效果不佳或背景著色深.有人認為聚苯乙烯吸附抗原好,,聚乙烯吸附抗體效果好.有一些預處理固相板的方法可以改善吸附,如廠家用射線照射,,使用者用乙酸,,鹽酸,戊二醛或多聚賴氨酸處理板.用戊二醛和鹽酸預處理板不僅促進吸附,,還能降低非特異性反應,,用多聚賴氨酸可增強某些多糖抗原的吸附.更多介紹詳情請咨詢.
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