產(chǎn)品名稱:禽腦脊髓炎(AE)ELISA試劑盒
英文名稱:Avian encephalomyelitis,AE ELISAKit
標本的收集與保存:標本一般包括血液(指血,,靜脈血),,尿,,糞便,腦脊液,,胸腹水,,前列腺液,精液,,陰道分泌物等,,這些標本收集的時間、方法和保存都有一定的要求,。
一,、血液標本
有些生理因素,如吸煙,、進食,、運動、情緒波動,、妊娠,、體位等均可影響血液中某些成分的變化,有些甚至還有晝夜變化,。因此血液標本的采集應盡量避免生理因素干擾,,以條件*為宜,如無法避免,,應在標本上注明該因素,。
1.外周血
一般選取左手無名指內(nèi)側采血,該部位應無凍瘡,,炎癥,,水腫,,破損。如該部位不符合要求,,以其他手指部位代替,。對燒傷病人,可選擇皮膚完整處采血,。由于部分血液常規(guī)檢測(如白細胞計數(shù),、分類等)受生理因素影響波動過大,比較時宜使條件盡量*,。涉及到體內(nèi)出,、凝血功能的檢測項目(如血小板計數(shù),出血時間或凝血時間等)的檢測,,一定要注意了解患者是否用過抗凝,、促凝藥物,以便在減少或避免干擾因素的影響,。
2.靜脈血
除涉及各種止血和血栓檢測等項目需采用抗凝靜脈血血漿外,,目前絕大多數(shù)檢測項目的分析檢測可直接采用靜脈血的血清。在血清檢測項目中,,有些(如血糖,,血脂等)受飲食及晝夜因素影響較大,一般以清晨空腹血標本為宜,;有些在血中衰變較快(血清酶活性測定如ACP活性等),,0~4℃貯存活性減弱也不一,這些項目的檢測必須及時而快速,;有些(如肌酸激酶等)受運動等因素影響較大,。抽血時避免溶血的發(fā)生也十分重要,尤其涉及血鉀,,LDH等的測定,。
二、尿液標本
同血標本一樣,,尿液標本受飲食,、運動、藥物量等因素的影響也較大,,特別是飲食的影響,,故一般來說晨尿優(yōu)于隨機尿。晨尿是指清晨起床后的*次尿標本,,較濃縮和酸化,,有形成分(如血細胞,上皮細胞,管形)相對集中便于觀察,。隨機尿即隨意一次尿,,留取方便,但受飲食,、運動,、藥物影響較甚,,易于出現(xiàn)假陽性和假陰性結果,,如飲食性蛋白尿,飲食性糖尿,,維生素C干擾潛血結果等,。餐后尿(午餐后2小時收集的患者尿液)適用于尿糖,尿蛋白和尿膽原的檢查,,此時的尿標本可增加試驗敏感性,,檢出較輕微的病變。12小時尿細胞計數(shù)即Addis計數(shù)(前晚8時排空膀胱后留取至次日晨8時的所有尿液),,因時間較長,,細菌易繁殖,須加入防腐劑甲醛,。24小時尿(*天晨8時排空膀胱后留取至次日晨8時的所有尿液)中化學物質(zhì)的定量,,包括蛋白,糖,,尿17-酮,、17-羥類固醇,兒茶酚胺,,Ca2+等,,檢測不同的物質(zhì),選擇不同的防腐劑防腐,。清潔中段尿多用于尿細菌培養(yǎng),,要求無菌,沖洗外陰后留取標本,。所有尿標本的收集都應足量,,zui少12 ml,50 ml,,定時尿須全部收集,,對女性患者應避免陰道分泌物、經(jīng)血污染尿標本,。
三,、糞便標本
糞便標本的檢測對判斷消化系統(tǒng)疾病有重要參考價值。采集時要求用干凈的竹簽選取含有粘液、膿血等異常病變成分的糞便,,對外觀無異常的糞便須從表面,、深處及糞端多處取材。找寄生蟲蟲體及作蟲卵計數(shù)應收集24小時糞便,。查痢疾阿米巴滋養(yǎng)體應于排便后立即檢查,,從有膿血和稀軟處取材,保溫送檢,。查日本血吸蟲蟲卵時應取粘液,、膿血部分,孵化毛蚴時至少留取30g糞便,,且需盡快處理,。檢查蟯蟲卵須用透明薄膜拭子于晚12時或清晨排便前自肛門周圍皺襞處拭取并立即鏡檢。隱血試驗(化學法),,試驗前3日禁食肉類及含動物血食物并禁服鐵劑,,維生素C等。所有糞便標本采集后1小時內(nèi)應檢查完畢,,以防止有形成分受消化酶及pH的破壞,。
四、腦脊液標本
腦脊液標本采集后立即送檢,,放置過久將影響檢驗結果:如細胞變性,,破壞,導致計數(shù)和分類不準,;有些化學物質(zhì)如葡萄糖等將分解含量減少,;細菌發(fā)生自溶影響細菌的檢出率。腦脊液抽取后一般分裝三個無菌管,,*管作細菌培養(yǎng),,第二管作化學分析和免疫學檢查,第三管作一般性狀及顯微鏡檢查,,三管的順序不宜顛倒,。因標本采集較難,全部送檢和檢測過程應注意安全,。
五,、胸腹水標本
與腦脊液標本一樣,采集后的標本注意安全,,及時送檢,。一般也分裝三管,一管作常規(guī)細胞學檢查,,一管生化檢查,,一管細菌培養(yǎng),,順序以與腦脊液相同為宜。
六,、前列腺液標本
前列腺液標本由前列腺按摩后采集,,液量少時直接滴在載玻片上及時送檢,須注意防止標本蒸干,,量多時收集在潔凈干燥的試管中,。若按摩不出前列腺液,可檢查按摩后的尿液沉渣,。
七,、精液標本
精液標本采集前應禁欲3~7天,排凈尿液后可用手淫法或其他方法將精液直接排入干凈的容器中,,保溫并及時送檢,。由于精子生成日間變動較大,一般應檢查2~3次(每次間隔1~2周)方可做診斷,。
八、陰道分泌物標本
陰道標本采集前24小時應禁止房事,、盆浴,、陰道檢查、陰道灌洗及局部上藥等,,取材所用器械需清潔,。一般用鹽水浸濕的棉拭子自陰道深部或陰道穹后部、宮頸管口等處取材,,制成生理鹽水涂片后觀察陰道分泌物標本,,經(jīng)期的女性患者不宜檢查陰道分泌物標本。
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ACA-IgA ELISAKit
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樣品采集:收集標本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定,。對收集后當天進行檢測的標本,,儲存在4℃?zhèn)溆茫缬刑厥庠蛐枰芷谑占瘶吮?,將標本及時分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存,。避免反復凍融。標本2-8℃可保存48小時,,-20℃可保存1個月,。-70度可保存6個月,。部分激素類標本需添加抑肽酶。ELISA原理實驗條件和技術要點
在應用ELISA時,,首先要清楚下面內(nèi)容:1,,是檢測抗體還是抗原?2,,檢測的結果是定性還是定量,?3,是否需要檢測特異抗體的類型,?4,,所用抗體/單克隆抗體的親和力怎樣?
(1)檢測抗原 zui常用于檢測抗原的方法是非競爭性的雙抗體夾心法,,其次是競爭法,。但競爭法在具體實驗中有些困難,特別是檢測微生物的抗原,,因為需要標記抗原,,這對于某些抗原是很難做到的,甚至是不可能的,。另外在競爭法中,,酶標記的抗原與標本直接混合在一起,許多標本中含有酶抑制劑或蛋白A樣物質(zhì),,可影響ELISA的結果,。
(2)檢測抗體 檢測抗體種類常用的方法是檢測抗體種類的捕獲法,這個方法常用于檢測特異性IgG,、IgA和IgM.,。這個方法的*步是捕獲所需要檢測的一個種類的抗體,接下來是檢測捕獲的抗體是否是特異性抗原的抗體,。間接ELISA在檢測IgG時比較簡單,,但不適用于檢測其他種類的抗體,因為血清中如果有特異IgG存在將與IgM或IgA等競爭結合抗原,。
保存條件及有效期:
1.試劑盒保存:2-8℃,。
2.有效期:6個月
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