產(chǎn)品名稱:人神經(jīng)肽Y(NP-Y)ELISA試劑盒
英文名稱:Y(NP-Y)ELISA
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神經(jīng)肽實驗原理:
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人神經(jīng)肽Y(NP-Y)水平,。用純化的人神經(jīng)肽Y(NP-Y)抗體包被微孔板,,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入神經(jīng)肽Y(NP-Y),,再與HRP標記的神經(jīng)肽Y(NP-Y)抗體結(jié)合,,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色,。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的神經(jīng)肽Y(NP-Y)呈正相關,。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),,通過標準曲線計算樣品中人神經(jīng)肽Y(NP-Y)濃度。
樣品采集:收集標本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定,。對收集后當天進行檢測的標本,,儲存在4℃?zhèn)溆茫缬刑厥庠蛐枰芷谑占瘶吮?,將標本及時分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。避免反復凍融,。標本2-8℃可保存48小時,,-20℃可保存1個月。-70度可保存6個月,。部分激素類標本需添加抑肽酶,。ELISA原理實驗條件和技術要點
在應用ELISA時,,首先要清楚下面內(nèi)容:1,是檢測抗體還是抗原,?2,,檢測的結(jié)果是定性還是定量?3,,是否需要檢測特異抗體的類型,?4,所用抗體/單克隆抗體的親和力怎樣,?
(1)檢測抗原 zui常用于檢測抗原的方法是非競爭性的雙抗體夾心法,,其次是競爭法。但競爭法在具體實驗中有些困難,,特別是檢測微生物的抗原,,因為需要標記抗原,這對于某些抗原是很難做到的,,甚至是不可能的,。另外在競爭法中,酶標記的抗原與標本直接混合在一起,,許多標本中含有酶抑制劑或蛋白A樣物質(zhì),,可影響ELISA的結(jié)果。
(2)檢測抗體 檢測抗體種類常用的方法是檢測抗體種類的捕獲法,,這個方法常用于檢測特異性IgG,、IgA和IgM.。這個方法的*步是捕獲所需要檢測的一個種類的抗體,,接下來是檢測捕獲的抗體是否是特異性抗原的抗體,。間接ELISA在檢測IgG時比較簡單,但不適用于檢測其他種類的抗體,,因為血清中如果有特異IgG存在將與IgM或IgA等競爭結(jié)合抗原,。
保存條件及有效期:
1.試劑盒保存:2-8℃。
2.有效期:6個月
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