產(chǎn)品名稱:人心鈉肽(ANP)ELISA試劑盒
英文名稱:Human ANP ELISAKit
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心鈉肽實驗原理:
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中人心鈉肽(ANP)水平,。用純化的人心鈉肽(ANP)抗體包被微孔板,,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中加入心鈉肽(ANP),,再與HRP標(biāo)記的心鈉肽 (ANP)抗體結(jié)合,,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色,。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的心鈉肽(ANP)呈正相關(guān),。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中人心鈉肽((ANP)的含量。
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樣品采集:收集標(biāo)本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。對收集后當(dāng)天進(jìn)行檢測的標(biāo)本,,儲存在4℃?zhèn)溆?,如有特殊原因需要周期收集?biāo)本,將標(biāo)本及時分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存,。避免反復(fù)凍融,。標(biāo)本2-8℃可保存48小時,-20℃可保存1個月,。-70度可保存6個月,。部分激素類標(biāo)本需添加抑肽酶。ELISA原理實驗條件和技術(shù)要點
在應(yīng)用ELISA時,,首先要清楚下面內(nèi)容:1,,是檢測抗體還是抗原?2,,檢測的結(jié)果是定性還是定量,?3,是否需要檢測特異抗體的類型,?4,,所用抗體/單克隆抗體的親和力怎樣?
(1)檢測抗原 zui常用于檢測抗原的方法是非競爭性的雙抗體夾心法,,其次是競爭法,。但競爭法在具體實驗中有些困難,,特別是檢測微生物的抗原,因為需要標(biāo)記抗原,,這對于某些抗原是很難做到的,甚至是不可能的,。另外在競爭法中,,酶標(biāo)記的抗原與標(biāo)本直接混合在一起,許多標(biāo)本中含有酶抑制劑或蛋白A樣物質(zhì),,可影響ELISA的結(jié)果,。
(2)檢測抗體 檢測抗體種類常用的方法是檢測抗體種類的捕獲法,這個方法常用于檢測特異性IgG,、IgA和IgM.,。這個方法的*步是捕獲所需要檢測的一個種類的抗體,接下來是檢測捕獲的抗體是否是特異性抗原的抗體,。間接ELISA在檢測IgG時比較簡單,,但不適用于檢測其他種類的抗體,因為血清中如果有特異IgG存在將與IgM或IgA等競爭結(jié)合抗原,。
保存條件及有效期:
1.試劑盒保存:2-8℃,。
2.有效期:6個月
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