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兔外周血單個(gè)核細(xì)胞分離液試劑盒說(shuō)明書(shū)
【產(chǎn)品規(guī)格】
200ml/Kit
【產(chǎn)品組成】
為方便廣大用戶使用,試劑內(nèi)容如下:
| 名稱 | 產(chǎn)品編號(hào) | 規(guī)格 |
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A | XXXX 動(dòng)物外周血單個(gè)核細(xì)胞分離液 |
| 200ml |
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B | 樣本稀釋液(贈(zèng)品) | 2010C1119 | 200ml |
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C | 清洗液(贈(zèng)品) | 2010X1118 | 200ml |
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D | 說(shuō)明書(shū) |
| 1 份 |
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【實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備】
A. 適用儀器
zui大離心力可達(dá) 1200g 的水平轉(zhuǎn)子離心機(jī)
B. 耗材
| 產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品貨號(hào) | 產(chǎn)地 |
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| 15ml 離心管散裝 | 339650 | 美國(guó) NUNC |
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| 15ml 離心管架裝 | 339651 | 美國(guó) NUNC |
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| 50ml 離心管散裝 | 339652 | 美國(guó) NUNC |
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| 50ml 離心管架裝 | 339653 | 美國(guó) NUNC |
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| 無(wú)菌膠頭滴管或塑料滴管 |
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【檢驗(yàn)方法】 |
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全過(guò)程樣本,、試劑及實(shí)驗(yàn)環(huán)境均需在 20±2℃的條件下進(jìn)行,。
首先取抗凝血按體積比 1:1 的比例加入樣本稀釋液(產(chǎn)品編號(hào):2010C1119)混勻,,根
據(jù)稀釋后的樣本量大小,分以下兩種情況:
情況 A:稀釋后的血液樣本量小于 5ml 時(shí),,實(shí)驗(yàn)方法如下:
情況 B:稀釋后的血液樣本量大于等于 5ml 時(shí),,實(shí)驗(yàn)方法如下:
【注意事項(xiàng)】
粒細(xì)胞數(shù)量增加,。
【儲(chǔ)存條件及有效期】
18-25℃保存,有效期 2 年,。本品易感染細(xì)菌,,需無(wú)菌條件操作。無(wú)菌條件下操作,,啟
封后置常溫保存,。如 4℃保存,本分離液易出現(xiàn)白色結(jié)晶,,影響分離效果,。
【參考值(參考范圍)】
本實(shí)驗(yàn)單個(gè)核細(xì)胞提取率及純度均大于 80%。
下表為成年人外周血中各種細(xì)胞的數(shù)量及比例,,用戶可適當(dāng)進(jìn)行參考,。
| 紅細(xì)胞 |
| 白細(xì)胞 |
| 血小板 |
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| (4.0-10.0)×109 |
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含量(個(gè)/L) | (4.0-5.5)×1012 | 中性粒細(xì)胞 | 淋巴細(xì)胞 | 單核細(xì)胞 | (1.0-3.0)×1011 |
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| 50%-70% | 20%-40% | 3%-8% |
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【相關(guān)實(shí)驗(yàn)技術(shù)方案】
C.原位雜交技術(shù)
D.PCR 技術(shù)
注:上述技術(shù)方案詳情請(qǐng)登陸本搜索“細(xì)胞分離,、
純化,、擴(kuò)增、鑒定及生物治療技術(shù)手冊(cè)”,,并在說(shuō)明書(shū)項(xiàng)目欄下下載使用,。
【可能存在的問(wèn)題及解決方法】
1. 由于血液粘度、細(xì)胞密度等差異可能造成的問(wèn)題及解決方案如下表所示:
出現(xiàn)情況 | 出現(xiàn)原因 | 建議解決方案 | |
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離心后目的細(xì)胞存在于血漿層或稀釋液層 | 轉(zhuǎn)速過(guò)小或離心時(shí)間過(guò)短 | 適當(dāng)增減轉(zhuǎn)速 | |
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離心后目的細(xì)胞存在于分離液中 | 轉(zhuǎn)速過(guò)大或離心時(shí)間過(guò)長(zhǎng) | ||
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離心后白環(huán)層彌散 | 細(xì)胞密度過(guò)大 | 調(diào)整細(xì)胞密度 | |
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離心后白環(huán)層太淺或看不見(jiàn) | 細(xì)胞密度過(guò)小 | ||
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能出現(xiàn)紅細(xì)胞沉降不*的情況,,可以適當(dāng)加大離心轉(zhuǎn)速。
注:在對(duì)離心條件進(jìn)行調(diào)整時(shí),,離心轉(zhuǎn)速的加減以 50-100g 為基數(shù),,直至達(dá)到分離效果,
離心力zui小不得小于 400g,,zui大不得大于 1200g,。離心時(shí)間以 20-30min 為準(zhǔn)。
請(qǐng)輸入賬號(hào)
請(qǐng)輸入密碼
請(qǐng)輸驗(yàn)證碼
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