選擇二級生物安全柜存在的問題和遵從的基本原則
在復(fù)雜而有效的病原微生物實(shí)驗(yàn)室中,，為了給有生物危害的工作提供一個(gè)理想和安全的工作環(huán)境，必須特別注重感染性病原微生物氣溶膠對實(shí)驗(yàn)室環(huán)境的污染和擴(kuò)散,，即控制環(huán)境污染,。在病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全中，已經(jīng)將環(huán)境污染控制作為對人員和實(shí)驗(yàn)對象保護(hù)的基本要求,?？刂茖?shí)驗(yàn)室環(huán)境污染的主要方法有：一是感染性氣溶膠與工作人員的隔離；二是控制實(shí)驗(yàn)室感染性材料工作區(qū)域內(nèi)通風(fēng)的方法、流量和方向,。人員與感染性物質(zhì)或氣溶膠的隔離是實(shí)驗(yàn)室生物安全要素,，通過適當(dāng)選擇和使用生物安全柜（biological safety cabinet，BSC）等安全設(shè)備,，能夠?qū)?shí)驗(yàn)室工作人員暴露于感染性病原微生物氣溶膠的危險(xiǎn)程度減小到小,。
1 生物安全柜類型和工作原理
在微生物實(shí)驗(yàn)室使用的生物安全柜（biological safety cabinet，BSC）有三個(gè)級別,，即Ⅰ級BSC,、Ⅱ級BSC和Ⅲ級BSC。前開式的Ⅰ級BSC,、Ⅱ級BSC是主要的防護(hù)屏障,，在使用良好的微生物操作技術(shù)前提下，它們能夠?qū)ぷ魅藛T和環(huán)境提供顯著的防護(hù)水平,；Ⅱ級BSC對在其中操作的材料（例如：細(xì)胞培養(yǎng),、血液等）也有保護(hù)和防止污染的作用；Ⅲ級BSC是一個(gè)密閉的袖套箱,，同樣具有保護(hù)人員,、試驗(yàn)對象和環(huán)境的功能，更多的情況是在動(dòng)物感染試驗(yàn)中使用,。BSC基本參數(shù)見表1,。
表1 Ⅱ級生物安全柜之間的差異
在美國,，Ⅱ級生物安全柜的設(shè)計(jì),、結(jié)構(gòu)和性能標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)該符合NSF49的要求；在歐洲,，Ⅱ級生物安全柜的設(shè)計(jì),、結(jié)構(gòu)和性能標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)該符合EN12469的要求；中國2005年已經(jīng)頒布了生物安全柜的行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)YY0569－2005《生物安全柜》,，也就是說,，今后國內(nèi)企業(yè)生產(chǎn)生物安全柜應(yīng)符合YY0569－2005《生物安全柜》的要求。
?、蚣壣锇踩裨谠O(shè)計(jì)上不但能提供個(gè)體防護(hù),，而且能保護(hù)工作臺(tái)面的物品不受房間空氣的污染。它們不同于Ⅰ級生物安全柜之處在于只讓經(jīng)HEPA過濾器過濾的（無菌的）空氣流過工作臺(tái)面,。Ⅱ級生物安全柜可用于操作2類和3類風(fēng)險(xiǎn)組的傳染性材料,。在使用正壓服的條件下，Ⅱ級生物安全柜也可用于操作4類風(fēng)險(xiǎn)組的傳染性材料（見圖1～3）,。
圖1 Ⅱ級A1型BSC原理圖
A：前開口,，B：可視窗,，C：排風(fēng)HEPA過濾器，D：后面的壓力排風(fēng)系統(tǒng),，E：供風(fēng)HEPA過濾器,，F：風(fēng)機(jī)。
圖2 Ⅱ級A2和B1型BSC原理圖
A：前開口,，B：可視窗,，C：排風(fēng)HEPA過濾器，D：供風(fēng)HEPA過濾器,，E：負(fù)壓壓力排風(fēng)系統(tǒng),，F：風(fēng)機(jī)，G：用于送風(fēng)的HEPA過濾器,。安全柜需要有與建筑物排風(fēng)系統(tǒng)相連接的排風(fēng)接口,。
圖3 Ⅱ級B2型BSC原理圖
A：前開口,，B：可視窗,，C：排風(fēng)HEPA過濾器，D：供風(fēng)HEPA過濾器,，E：負(fù)壓壓力排風(fēng)系統(tǒng),，F：風(fēng)機(jī)，G：用于送風(fēng)的HEPA過濾器,。安全柜需要有與建筑物排風(fēng)系統(tǒng)相連接的排風(fēng)接口和送風(fēng)口,。
根據(jù)結(jié)構(gòu)、氣流動(dòng)力學(xué)和排氣系統(tǒng)的特點(diǎn),，Ⅱ級BSC又可以分為A1型,、A2型、B1型和B2型,。由于Ⅱ級A1型BSC內(nèi)的空氣是在柜內(nèi)循環(huán)的,，排出的空氣又進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室的空間，因此,，Ⅱ級A1型BSC適合于沒有揮發(fā)或有毒的化學(xué)物質(zhì)和放射性物質(zhì)的工作,；Ⅱ級B型生物安全柜內(nèi)的污染空氣經(jīng)過濾器過濾后，通過管道系統(tǒng)部分或全部排出實(shí)驗(yàn)室,，因此,，Ⅱ級B型生物安全柜適合于某些揮發(fā)或有毒的化學(xué)物質(zhì)和放射性物質(zhì)的工作（見表2）。
表2 根據(jù)不同保護(hù)類型對生物安全柜的選擇
綜上所述,，Ⅱ級BSC內(nèi)的污染空氣通過下列方式排出：（a）先經(jīng)安全柜的HEPA過濾器排到實(shí)驗(yàn)室中,，然后再通過實(shí)驗(yàn)室排風(fēng)系統(tǒng)排到建筑物外面；（b）通過實(shí)驗(yàn)室排風(fēng)系統(tǒng)的HEPA過濾器排到建筑物外面,；（c）直接經(jīng)安全柜的HEPA過濾器排到建筑物外面,。HEPA過濾器可以裝在生物安全柜的壓力排風(fēng)系統(tǒng)里,，也可以裝在建筑物的排風(fēng)系統(tǒng)里。
2?、蚣壣锇踩襁x擇中存在的一些問題
2．1 不了解Ⅱ級BSC的性能,，誤認(rèn)為型別越高越好
Ⅱ級BSC分為A1型,、A2型,、B1型和B2型四個(gè)型別（差異見表1），它們對微生物氣溶膠的防護(hù)性能是一樣的,。根據(jù)國內(nèi)外和世界衛(wèi)生組織的相關(guān)要求和標(biāo)準(zhǔn),，微生物和生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室的生物安全防護(hù)等級（Biosafety level， BSL）的要求,，可以分為BSL-1實(shí)驗(yàn)室,、BSL-2實(shí)驗(yàn)室、BSL-3實(shí)驗(yàn)室和BSL-4實(shí)驗(yàn)室,，其中BSL-1實(shí)驗(yàn)室防護(hù)等級低,，BSL-4實(shí)驗(yàn)室防護(hù)等級高。BSL-1實(shí)驗(yàn)室一般選擇I級BSC和Ⅱ級A1型BSC,；BSL-2實(shí)驗(yàn)室一般選擇Ⅱ級BSC分為A1型,、A2型、B1型的三種BSC,；BSL-3實(shí)驗(yàn)室和防護(hù)服型BSL-4實(shí)驗(yàn)室一般選擇Ⅱ級BSC分為A2型,、B1型、B2型的三種BSC,。
但是,，目前國內(nèi)許多BSL-2實(shí)驗(yàn)室在選擇Ⅱ級BSC時(shí)，都選擇Ⅱ級B2型BSC,。選購者認(rèn)為在BSL-2實(shí)驗(yàn)室中使用Ⅱ級B2型BSC,，生物安全防護(hù)更好。其實(shí)不然,，所有Ⅱ級BSC的生物防護(hù)性能（人員保護(hù),、樣品保護(hù)和交叉污染）是一致的，不存在越高越好的問題,。正常情況下,，Ⅱ級BSC的使用壽命為5年，如果使用這種全新風(fēng)的Ⅱ級B2型BSC,，其使用壽命將大大地縮短,；此外，頻繁更換粒子過濾器（HEPA）,，也將嚴(yán)重影響工作,。
2．2 沒有考慮實(shí)驗(yàn)室工作的性質(zhì)
?、蚣?span style="font-family:??,serif">BSC的A1型、A2型,、B1型和B2型四個(gè)型別,，對微生物氣溶膠的防護(hù)性能是一樣的，對化學(xué)試劑,、放射性物質(zhì)等物質(zhì)的氣溶膠或蒸氣的防護(hù)性能存在著一定的差異（見表3）,。
表3 Ⅱ級生物安全柜防護(hù)特征比較
有些微生物實(shí)驗(yàn)室、生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室在選擇Ⅱ級BSC時(shí),，如果不考慮工作性質(zhì),，僅考慮價(jià)格等非性能因素，是片面的,，購置的Ⅱ級BSC為必滿足工作的需要,，或造成經(jīng)費(fèi)的浪費(fèi)。
2．3 沒有考慮實(shí)驗(yàn)室設(shè)施的狀況
目前,，國內(nèi)微生物實(shí)驗(yàn)室和生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室,，購置Ⅱ級BSC的實(shí)驗(yàn)室主要于BSL-2實(shí)驗(yàn)室和BSL-3實(shí)驗(yàn)室。但許多BSL-2實(shí)驗(yàn)室購置單位的實(shí)驗(yàn)室設(shè)施在建造時(shí),，沒有考慮到給Ⅱ級BSC預(yù)留的位置和排風(fēng)管道和室內(nèi)空氣凈化系統(tǒng),。有的實(shí)驗(yàn)室在購置Ⅱ級BSC時(shí)沒有考慮設(shè)施的問題,，Ⅱ級BSC買回來后,，沒有合適的放置位置，或沒有排風(fēng)管道的位置,，有額外花一筆經(jīng)費(fèi)改造實(shí)驗(yàn)室,。
2．4 沒有與實(shí)驗(yàn)室工作人員溝通
微生物實(shí)驗(yàn)室和生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室在購置Ⅱ級BSC時(shí)，沒考慮實(shí)驗(yàn)室工作人員的素質(zhì),，對Ⅱ級BSC的工作原理和防護(hù)性能是否了解,，如何使用和維護(hù)等，僅憑Ⅱ級BSC銷售商或生產(chǎn)廠家的介紹或推薦,，進(jìn)行選購,。其結(jié)果是，買回來的Ⅱ級BSC不是自己想要的,，或不能*工作的需要,。有的Ⅱ級BSC的操作較為復(fù)雜，工作人員不會(huì)操作,，甚至因誤操作,，導(dǎo)致Ⅱ級BSC在不正常的狀態(tài)下工作，導(dǎo)致意外的事故發(fā)生,。
3 選擇Ⅱ級BSC遵從的基本原則
3．1 實(shí)驗(yàn)室危害評估
無論是微生物實(shí)驗(yàn)室,，還是生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室,；無論是BSL-2實(shí)驗(yàn)室，還是BSL-3實(shí)驗(yàn)室,，在選擇和購置Ⅱ級BSC之前,，應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)室開展的研究工作的性質(zhì)，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室危害評估,。實(shí)驗(yàn)室危害評估包括：病原微生物的危害評估,、放射性核素的危害評估和揮發(fā)性有毒化學(xué)試劑的危害評估。在實(shí)驗(yàn)室危害評估的基礎(chǔ)上,，主要根據(jù)所需保護(hù)的類型來選擇適當(dāng)?shù)纳锇踩瘢簩?shí)驗(yàn)對象保護(hù),、對于1～4類危險(xiǎn)組微生物的個(gè)體防護(hù)、暴露于放射性核素和揮發(fā)性有毒化學(xué)試劑時(shí)的個(gè)體防護(hù),、或上述各種防護(hù)的不同組合,。表2和3列出了每一種防護(hù)類型所推薦的生物安全柜。
所有可能使致病微生物及其毒素濺出或產(chǎn)生氣溶膠的操作,，都必須在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行,。不得用超凈工作臺(tái)代替生物安全柜。在必要時(shí),，實(shí)驗(yàn)室還應(yīng)配備其他安全設(shè)備,，如設(shè)置配有排風(fēng)凈化裝置的排氣罩等，或采用其它不使致病微生物逸出,，才能確保其安全,。
通常Ⅱ級A型BSC是用于不涉及有害化學(xué)品的日常的微生物實(shí)驗(yàn)； Ⅱ級B型BSC是為了更好的除去有害氣體,、煙塵或限制其擴(kuò)散的生物研究,。為此，選Ⅱ級A型BSC,，還是Ⅱ級B型BSC的關(guān)鍵：不是取決于病原微生物的因素,，而是操作人員是否會(huì)用到揮發(fā)性的有害物質(zhì)或放射性物質(zhì)的因素來決定的。操作揮發(fā)性或有毒化學(xué)試劑時(shí),，不應(yīng)該使用Ⅱ級A1型及A2型生物安全柜,，Ⅱ級B1型BSC可用于操作少量揮發(fā)性化學(xué)試劑和放射性核素，Ⅱ級B2型BSC也稱為全排放型安全柜,，在需要操作大量放射性核素和揮發(fā)性化學(xué)試劑時(shí),，必須使用Ⅱ級B2型BSC（見表3）。因而,，在選用Ⅱ級BSC時(shí)必須綜合考慮,，即要滿足實(shí)際工作需求，又能達(dá)到安全的目的,。
3．2 應(yīng)考慮實(shí)驗(yàn)室設(shè)施的結(jié)構(gòu)特征
有些實(shí)驗(yàn)室沒有預(yù)留專門的排風(fēng)管道,，或其他管道,；有的實(shí)驗(yàn)室是中央空調(diào)送風(fēng)系統(tǒng)，實(shí)驗(yàn)室房間天花板上有固定的送風(fēng)口,；有的實(shí)驗(yàn)室空氣的補(bǔ)充是通過開窗或開門來實(shí)現(xiàn)的,，因此，在選擇和購置Ⅱ級BSC時(shí),，應(yīng)充分考慮和分析這些因素,，選擇合適的Ⅱ級BSC。
3．3 應(yīng)考慮Ⅱ級BSC使用時(shí)消毒的簡捷性
?、蚣?span style="font-family:??,serif">BSC在每天使用完畢后,，都應(yīng)進(jìn)行工作區(qū)域表面消毒，消毒時(shí)應(yīng)能夠保證工作人員的手臂能夠方便地伸到工作區(qū)的各個(gè)角落,，進(jìn)行消毒處理,。
3．4 應(yīng)考慮Ⅱ級BSC工作時(shí)的噪音問題
因?yàn)椋蚣?span style="font-family:??,serif">BSC是實(shí)驗(yàn)室生物安全的道防護(hù)屏障,，有時(shí)工作人員要在Ⅱ級BSC中工作很長時(shí)間,。因而，Ⅱ級BSC的噪音大小非常重要,，應(yīng)盡可能選擇噪音小的Ⅱ級BSC,。
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