母種培養(yǎng)基的配制
1.器具：試管 刀 天平 鋁鍋 棉塞 紗布 漏斗 燒杯 量筒
2.常用的母種培養(yǎng)基配方
①馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基(PDA)：馬鈴薯(去皮)200g,，葡萄糖20g,。瓊脂20g，水1000ml,，{如果需要配制250ml的培養(yǎng)基,，那么馬鈴薯、葡萄糖,、瓊脂的比例是50:5:5},，也可用蔗糖取代葡萄糖，即為PSA培養(yǎng)基,。還可以添加磷酸二氫鉀3g,，硫酸鎂1.5g，維生素B1 10㎎,，即為馬鈴薯綜合培養(yǎng)基,。廣泛適用于各種食用菌母種的分離,，培養(yǎng)和保藏。
?、隈R鈴薯玉米粉培養(yǎng)基：馬鈴薯(去皮)200g,，蔗糖20g，玉米粉50g,，瓊脂20g,，磷酸二氫鉀1g，硫酸鎂0.5g,，水1000ml,。本配方適合于香菇、黑木耳,、猴頭菌的培養(yǎng)。
?、垴R鈴薯黃豆粉培養(yǎng)基：馬鈴薯200g,，蔗糖20g，瓊脂20g,，黃豆粉20g,，碳酸鈣10g，磷酸二氫鉀1g,，硫酸鎂0.5g,，水1000ml。適用于蘑菇,、草菇,。
④葡萄糖蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基：葡萄糖20g,，蛋白胨20g,，瓊脂20g，水1000ml,。
?、莸鞍纂恕⒔湍?、葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基：蛋白胨2g,，酵母膏2g，硫酸鎂0.5g,，磷酸二氫鉀0.5g,，磷酸氫二鉀1g，葡萄糖20g,，維生素B1 20㎎,，瓊脂20g,，水1000ml。
具體步驟
1.計算,。按照選定的培養(yǎng)基配方,，計算各種成分的用量。
2.稱量,。用天平秤取各種物質(zhì),，馬鈴薯去皮去芽眼，削掉青綠部分,，對不易稱量的成分,，可用玻棒和燒杯稱重，微量元素等需要量少,，難以稱準時,，可先配成較濃的原液，再從中取出需要的量,。
3.配制,。若配制合成培養(yǎng)基，先量取蒸餾水,，加入瓊脂,，加熱溶化;再加入稱好的其他物質(zhì)。為避免發(fā)生沉淀造成營養(yǎng)損失,，加入的順序一般是先加緩沖劑,，再依次加入主要元素、微量元素和維生素等;若各種成分均不發(fā)生沉淀,，也可一起加入,。
4.煮汁，去濾液,。馬鈴薯切成1㎝見方的小塊或2~3㎜厚的薄片,，加水約1200ml煮沸，再用文火保持20~30分鐘,、并適當攪拌,，使營養(yǎng)物質(zhì)充分溶解出來，然后用4層預濕的紗布過濾,，取其濾液,。
5.補足水量，加藥品溶化,。補足水量至1000ml,，然后往濾液中加入瓊脂，小火加熱,，攪拌至瓊脂溶解,，再加入葡萄糖和其他營養(yǎng)物質(zhì)使其溶化后,，用PH試紙檢測其PH值，可根據(jù)需要使用氫氧化鈉和鹽酸,，調(diào)整適宜的酸堿度,，進行分裝。注意開鍋攪拌,，防止溢出或焦底,。
6.分裝試管。制備好的培養(yǎng)基應趁熱分裝,，可用玻璃試管,，先把較大的玻璃漏斗固定在滴定架上，下接一段乳膠管和玻璃管,，用彈簧夾夾住膠管,。手拿試管，分裝量掌握在試管長度的四分之一,。注意分裝時,，培養(yǎng)基不能粘在試管口壁上，否則會污染棉塞,。
7.賽棉塞，注意要松緊適度,。
8.高壓鍋滅菌30分鐘,。
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