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　　母種培養(yǎng)基的配制

　　1.器具：試管 刀 天平 鋁鍋 棉塞 紗布 漏斗 燒杯 量筒

　　2.常用的母種培養(yǎng)基配方

　?、亳R鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基(PDA)：馬鈴薯(去皮)200g，葡萄糖20g,。瓊脂20g,，水1000ml，{如果需要配制250ml的培養(yǎng)基,，那么馬鈴薯,、葡萄糖、瓊脂的比例是50:5:5},，也可用蔗糖取代葡萄糖,，即為PSA培養(yǎng)基。還可以添加磷酸二氫鉀3g,，硫酸鎂1.5g,，維生素B1 10㎎，即為馬鈴薯綜合培養(yǎng)基,。廣泛適用于各種食用菌母種的分離,，培養(yǎng)和保藏,。

　　②馬鈴薯玉米粉培養(yǎng)基：馬鈴薯(去皮)200g,，蔗糖20g,，玉米粉50g，瓊脂20g,，磷酸二氫鉀1g,，硫酸鎂0.5g，水1000ml,。本配方適合于香菇,、黑木耳、猴頭菌的培養(yǎng),。

　?、垴R鈴薯黃豆粉培養(yǎng)基：馬鈴薯200g，蔗糖20g,，瓊脂20g,，黃豆粉20g，碳酸鈣10g,，磷酸二氫鉀1g,，硫酸鎂0.5g，水1000ml,。適用于蘑菇,、草菇。

　?、芷咸烟堑鞍纂谁傊囵B(yǎng)基：葡萄糖20g,，蛋白胨20g，瓊脂20g,，水1000ml,。

　　⑤蛋白胨,、酵母,、葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基：蛋白胨2g，酵母膏2g,，硫酸鎂0.5g,，磷酸二氫鉀0.5g，磷酸氫二鉀1g,，葡萄糖20g,，維生素B1 20㎎，瓊脂20g，水1000ml,。

　　具體步驟

　　1.計(jì)算,。按照選定的培養(yǎng)基配方，計(jì)算各種成分的用量,。

　　2.稱量,。用天平秤取各種物質(zhì)，馬鈴薯去皮去芽眼,，削掉青綠部分，對(duì)不易稱量的成分,，可用玻棒和燒杯稱重,，微量元素等需要量少，難以稱準(zhǔn)時(shí),，可先配成較濃的原液,，再從中取出需要的量。

　　3.配制,。若配制合成培養(yǎng)基,，先量取蒸餾水，加入瓊脂,，加熱溶化;再加入稱好的其他物質(zhì),。為避免發(fā)生沉淀造成營養(yǎng)損失，加入的順序一般是先加緩沖劑,，再依次加入主要元素,、微量元素和維生素等;若各種成分均不發(fā)生沉淀，也可一起加入,。

　　4.煮汁,，去濾液。馬鈴薯切成1㎝見方的小塊或2~3㎜厚的薄片,，加水約1200ml煮沸,，再用文火保持20~30分鐘、并適當(dāng)攪拌,，使?fàn)I養(yǎng)物質(zhì)充分溶解出來,，然后用4層預(yù)濕的紗布過濾，取其濾液,。

　　5.補(bǔ)足水量,，加藥品溶化。補(bǔ)足水量至1000ml,，然后往濾液中加入瓊脂,，小火加熱，攪拌至瓊脂溶解，再加入葡萄糖和其他營養(yǎng)物質(zhì)使其溶化后,，用PH試紙檢測(cè)其PH值,，可根據(jù)需要使用氫氧化鈉和鹽酸，調(diào)整適宜的酸堿度,，進(jìn)行分裝,。注意開鍋攪拌，防止溢出或焦底,。

　　6.分裝試管,。制備好的培養(yǎng)基應(yīng)趁熱分裝，可用玻璃試管,，先把較大的玻璃漏斗固定在滴定架上,，下接一段乳膠管和玻璃管，用彈簧夾夾住膠管,。手拿試管,，分裝量掌握在試管長(zhǎng)度的四分之一。注意分裝時(shí),，培養(yǎng)基不能粘在試管口壁上,，否則會(huì)污染棉塞。

　　7.賽棉塞,，注意要松緊適度,。

　　8.高壓鍋滅菌30分鐘。

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