目的：建立一套適用的培養(yǎng)操作規(guī)程，進(jìn)行無(wú)污染條件下體外細(xì)胞擴(kuò)大培養(yǎng),。
主體內(nèi)容：
操作步驟：
1,、紫外燈照射超凈工作臺(tái)30分鐘（根據(jù)實(shí)際情況，可適當(dāng)延長(zhǎng)或縮短照射時(shí)間,，但時(shí)間長(zhǎng)一點(diǎn)總比時(shí)間短一點(diǎn)安全,。）
2,、將培養(yǎng)液,、PBS、胰酶放在37℃水浴中溫育（每次用多少,，溫育多少,，這樣既可節(jié)約溫育的時(shí)間，又可延長(zhǎng)藥品的使用期限。）
3,、超凈工作臺(tái)照射30分鐘后,，關(guān)閉紫外，打開(kāi)照明,，打開(kāi)排風(fēng)10分鐘后再次進(jìn)入細(xì)胞培養(yǎng)室,。（注意：要打開(kāi)排風(fēng)10分鐘后再進(jìn)行操作，這樣才能保證循環(huán)的風(fēng)是無(wú)菌的,。同時(shí)還會(huì)避免有菌的風(fēng)直接吹到人的呼吸道中,，對(duì)人體也有一定的保護(hù)作用）
4、戴上口罩及手套（有條件的好戴上帽子,，不過(guò)也沒(méi)關(guān)系,，我們實(shí)驗(yàn)室就沒(méi)戴）
5、用70-75%的酒精擦試實(shí)驗(yàn)物品,，然后拿入超凈工作臺(tái)中,。
6、操作時(shí)注意以下幾點(diǎn)：盡量在酒精燈火焰附近操作,，但如果管子里有細(xì)胞就要離火焰有一定距離了,，否則細(xì)胞要燙死了；不要重復(fù)使用移液管（即吸一次后,，就換新的管）,；不要在敞開(kāi)的容器上方操作；手上的酒精不要擦太多,，否則靠近酒精燈時(shí)容易把手燒到（我想很多人都有過(guò)被燒的經(jīng)歷吧）,；
其實(shí)操作是很簡(jiǎn)單的，但一定要仔細(xì),。尤其是第2步許多人都不注意,，細(xì)胞平時(shí)放在37℃培養(yǎng)，如果加入的PBS或胰酶溫度太低,，會(huì)對(duì)細(xì)胞有操傷的,，雖然這種損傷短期內(nèi)察覺(jué)不到，但時(shí)間長(zhǎng)了,，就會(huì)顯現(xiàn)出來(lái),。
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